人P选择素(P-Selectin/CD62P/GMP140)检测试剂盒实验操作常见问题分析
异常 | 结果描述 | 原因分析 | 对策 |
白板 | 显色步骤结束后,酶标板所有孔均无颜色。阳性对照不显色。 | 试剂已过效期,或不同试剂盒组分混用 | 检查试剂的组分及批号,确认未过期以及所有组分均属对应的试剂盒。不同试剂盒或不同批号的试剂不能混用。 |
错加、漏加试剂底物、显色剂 A或B | 严格按人P选择素(P-Selectin/CD62P/GMP140)检测试剂盒说明书的步骤操作,加完试剂后可观察一下液面高度是否一致,以减少漏加现象。 | ||
洗板及加样过程中,酶标受污染失活失去催化显色剂显色的能力 | 确认盛酶标的容器不含酶抑制剂如叠氮钠等,确认配制洗液的容器已洗干净。 | ||
终止液误作洗涤液稀释或当底物缓冲液配制 | 每次配制时都应看清标签标明物质 | ||
蒸馏水有问题 | 确认配制洗液的纯化水达到要求且未污染,与好蒸馏水比较。 |
标本及采集、贮运因素:严重溶血 ,以 HRP 为标记的ELISA 测定中,残留在孔内的血红蛋白具有过氧化物酶样活性,催化底物显色造成假阳性; 混有红细胞的血清 易沉淀或附着在聚乙烯孔内不易洗净;如有 细菌污染 ,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应; 标本凝固不全 ,有时为了争取时间快速检测,常在血液还未开始凝固时即强行离心分离血清,使血清中仍残留部分纤维蛋白原,在ELISA测定过程中可以形成肉眼可见的纤维蛋白块,易造成假阳性结果; 采血试管洗涤不彻底 、反复使用易交叉污染; 塑料试管能吸附抗原物质 ,样本久置在塑料管内会使样本内抗原含量下降造成假阴性。
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人P选择素(P-Selectin/CD62P/GMP140)检测试剂盒
人P选择素(P-Selectin/CD62P/GMP140)检测试剂盒 人P选择素(P-Selectin/CD62P/GMP140)检测试剂盒使用说明书 本试剂盒仅供研究使用。 检测范围: 规格:96T/48T 使用目的: 本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人P选择素(P-Selectin/CD62P/GMP140)含量。 实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人P选择素(P-Selectin/CD62P/GMP140)水平。用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入人P选择素(P-Selectin/CD62P/GMP140)抗原、生物素化的人P选择素(P-Selectin/CD62P/GMP140)抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人P选择素(P-Selectin/CD62P/GMP140)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
生物产业
2015/03/09
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企业名称
上海信裕生物技术有限公司
企业信息已认证
企业类型
信用代码
310112001202097
成立日期
2012-08-17
注册资本
50
经营范围
上海信裕生物技术有限公司
公司地址
上海市松江区新九广场卖新公路2077号3楼8306室
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