甲状腺素放免试剂盒操作说明书
T4(HY-10002) RIA KIT
甲状腺素(T4)又名一四碘甲状腺原氨酸,分子量为777。T4是甲状腺分泌的主要甲状腺激素之一,T4从甲状腺分泌到血循环后99.5%与甲状腺素结合球蛋白(TBG)、甲状腺素结合前蛋白和白蛋白等结合,其作用使激素防止由肾脏排出体外。T4与三种蛋白质结合的百分率,分别为70%、20%、10%,在血循环中只有0.05%的T4为游离状态(FT4)。T4可以经脱碘酶的作用形成生物活性更强的三碘甲状腺原氨酸(T3)。T4主要功能为调节蛋白质及脂肪的代谢,促进生长发育等。血循环中T4的水平受丘脑—垂体—甲状腺轴系统负反馈机制所调节。由于T4绝大部分与TBG等结合,血中总T4水平必然受血中TBG的影响。为了纠正TBG的影响,联合125I-T3的摄取率测定,计算游离T4指数,将获得有意义的结果。甲状腺疾病是内分泌系统常见的疾病,总T4放射免疫测定是研究甲状腺功能最有效最常用的方法之一。
药盒组成:
1、 T4标记(红色)1瓶 。
2、 T4 抗体1(蓝色)瓶。
3、 分离剂(第二抗体)一瓶。
4、 T4标准品6瓶。其浓度分别为:0、20、40、80、160、320ng/ml(即:0、25.74、51.48、102.96、205.92、411.84)。
以上各组试剂均应摇匀使用。
甲状腺素放免试剂盒操作说明书操作方法:
1、样品处理:取晨空腹静脉采血,分离血清。(2-8)℃放置可保存7天,若冰冻保存,可放置四周。脂血或溶血样品影响测定结果。
2、 实验方法:试管编号,按下表程序操作:
操作表 ( 单位: ul)
管 别 | 标准管 | 样品 | 抗血清 | 蒸馏水 | 125I-T4 | 混匀,37℃温育1小时,任取三管测总T(CPM) | 分离剂 |
NSB管 | 50(S0) | -- | -- | 100 | 200 | 500 |
S0管 | 50 | -- | 100 | -- | 200 | 500 |
S1-S末管 | 50 | -- | 100 | -- | 200 | 500 |
样品管 | -- | 50 | 100 | -- | 200 | 500 |
混匀,室温放置15分钟,离心(3500转/分)15分钟,吸弃上清液,测定各管沉淀的放射性计数(CPM)。
数据处理:
1、计算机处理:建议函数模型采用三次多项式或log~logit法。
2、计算、绘图法:
计算各管的百分结合率:以S0(cpm数)为B0,各标准管Si(cpm数)为Bi,求各管的百分结合率。
(1)线性回归:用logX~logitY回归,求出r、a、b值,样品含量可由下式计算得出。
(2)绘图法:用各标准点计算的结果,在半对数坐标纸上绘制Bi/B0~logX标准曲线图或在log~logit坐标纸上绘制标准曲线图,未知样品浓度可根据Bi/B0的百分结合率从标准曲线图上查出。
正常叁考值:
各实验室应建立自己的正常值,下列正常参考值仅供参考:
T4(n=150):50~126 ng/mL (64.30~162 .2nmol / L)
甲状腺素放免试剂盒操作说明书技术特性:
1、曲线范围:(20~320)ng/Ml (25.74~411.84nmol / L)
2、灵敏度: < 3ng/mL(3.86nmol / L)
3、特异性:T4抗血清与T3的交叉反应合格。
4、精密度:批内CVw<10%,批间CVb<15%
5、单位换算:(nmol/L)=(ng/Ml)×1.287
保存及有效期:
药盒于(2~8)℃避光保存,切勿冻存。自检定合格之日起有效期为45天。
药盒参考数据:
指标 | B/T(%) | Bi/B0(%) |
项目 | NSB | S0 | S1 | S末 |
参数 | <5 | ≥55 | 80 | 15
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