Western 印迹膜封膜液

Western 印迹膜封膜液本实验方法的基本原理是，在高盐状态下，硅胶膜专一性地吸附DNA；而在低盐或水溶液状态下，DNA被洗脱下来。此法简便快捷，可在30分钟内同时提纯二十多个样品。从3～5ml培养过夜的含高拷贝质粒的菌液中可以获得10～20μg高纯度的质粒DNA，用于酶切、转化、DNA自动测序和手工测序等。

Western 印迹膜封膜液是一种使用破壁酶(Lyticase)消化去除酵母细胞壁，然后采用一种新型的酵母质粒纯化柱实现从酵母细胞中进行小量质粒快速抽提的试剂盒。

1无需酚氯仿抽提，无需酒精沉淀，12个样品只需约1-1.5小时即可完成。

2试剂盒提供了破壁酶(Lyticase)，酵母收集后，加入Lyticase消化去除细胞壁，接着采用传3统碱裂法裂解细胞，然后将获得的上清液转移至结合柱结合DNA，经过离心快速洗涤，最后用洗脱液洗脱出酵母质粒DNA。

4由于采用了高浓度的破壁酶，无需再使用玻璃珠，可以避免因为玻璃珠的机械作用带来的酵母基因组DNA污染。

Western 印迹膜封膜液纯化柱可以结合的质粒量的上限约为20微克。质粒DNA的产量依赖于酵母携带质粒的拷贝数，酵母菌株以及生长条件。通常酵母质粒的拷贝数较低，1.5-5ml培养过夜的酵母抽提获得的质粒DNA量约为1-3微克左右。高拷贝酵母质粒抽提时的得率会大大提高。抽提所得质粒的量与酵母培养浓度、质粒拷贝数、酵母品系等因素有关。

使用本试剂盒抽提得到的酵母质粒DNA可用于各种常规分子生物学实验，如转化、PCR、基于PCR的突变、体外转录、酶切、测序、文库筛选等。

Western 印迹膜封膜液相关产品如下：

70501-100 一站式沉淀法miRNAout 

80104-50 一站式柱式miRNAout 

80906-5 一站式大提柱式miRNAout 

80908-25 一站式动物mRNA提取试剂盒 

81108-25 一站式全血mRNA提取试剂盒 

81028-25 一站式植物mRNA提取试剂盒 

81103-25 一站式真菌mRNA提取试剂盒 

80817-25 mRNA提取试剂盒 

90301-25 Oligo（dT）纤维素

3090-100 固相RNase清除剂 

3090-250 固相RNase清除剂 

3091-1.5 液相RNase清除剂 

Oct-10 氧钒核糖核苷复合物（RVC） 

3100-1.5 RNA长效保存液 

3290-400 RNase抑制剂 

3290-2500 RNase抑制剂  

60201-1.5 非酶DNA清除剂 

70801-15 非酶DNA清除剂-2 

90318-50 柱式DNA清除剂 

90802-5 大提柱式DNA清除剂 

101001-500 Benzonase核酸酶 

90903-300 无RNase的DNase 

101004A-100 DnaseⅠ（干粉） 

101004B-100 DnaseⅠ（干粉含Buffer和贮存液） 

90904-50 膜结合DNA清除试剂盒 

60204-10 非酶多糖清除剂 

81027-50 TRIzol伴侣 

71207-5 RNA洗脱液 

3660-100 非冻型组织DNA保存液