Pfu DNA聚合酶

Pfu DNA聚合酶本实验方法的基本原理是，在高盐状态下，硅胶膜专一性地吸附DNA；而在低盐或水溶液状态下，DNA被洗脱下来。此法简便快捷，可在30分钟内同时提纯二十多个样品。从3～5ml培养过夜的含高拷贝质粒的菌液中可以获得10～20μg高纯度的质粒DNA，用于酶切、转化、DNA自动测序和手工测序等。

Pfu DNA聚合酶是一种使用破壁酶(Lyticase)消化去除酵母细胞壁，然后采用一种新型的酵母质粒纯化柱实现从酵母细胞中进行小量质粒快速抽提的试剂盒。

1无需酚氯仿抽提，无需酒精沉淀，12个样品只需约1-1.5小时即可完成。

2试剂盒提供了破壁酶(Lyticase)，酵母收集后，加入Lyticase消化去除细胞壁，接着采用传3统碱裂法裂解细胞，然后将获得的上清液转移至结合柱结合DNA，经过离心快速洗涤，最后用洗脱液洗脱出酵母质粒DNA。

4由于采用了高浓度的破壁酶，无需再使用玻璃珠，可以避免因为玻璃珠的机械作用带来的酵母基因组DNA污染。

Pfu DNA聚合酶纯化柱可以结合的质粒量的上限约为20微克。质粒DNA的产量依赖于酵母携带质粒的拷贝数，酵母菌株以及生长条件。通常酵母质粒的拷贝数较低，1.5-5ml培养过夜的酵母抽提获得的质粒DNA量约为1-3微克左右。高拷贝酵母质粒抽提时的得率会大大提高。抽提所得质粒的量与酵母培养浓度、质粒拷贝数、酵母品系等因素有关。

使用本试剂盒抽提得到的酵母质粒DNA可用于各种常规分子生物学实验，如转化、PCR、基于PCR的突变、体外转录、酶切、测序、文库筛选等。

Pfu DNA聚合酶相关产品如下：

100872        蛋白非变性-PAGE电泳液（干粉） 

分子量标准

70704A     预染蛋白质电泳分子量标准 

70704B        预染蛋白质电泳分子量标准 

70103-1 蛋白质电泳及转膜示踪剂 

70102A   蛋白质电泳分子量标准 

70102B        蛋白质电泳分子量标准 

70102C        蛋白质电泳分子量标准 

蛋白回收

90402-50 微量蛋白胶回收试剂盒 

90403-5 中量蛋白胶回收试剂盒 

61204-10 一步式PAGE染液 

80812-250 考马斯亮蓝染液 

101003-0.5 纳克级蛋白凝胶荧光染料 

100607-1000 超快蛋白银染试剂盒 

100811-10 质谱兼容蛋白银染试剂盒 

70101-125 瞬间可逆蛋白印迹膜染液 

81206        氨基黑染膜液 

100924         丽春红S染膜液 

81215A-20 一站式免疫印迹套装 

81215B-20 一站式免疫印迹套装 

100928-20 移湿法电转缓冲液 

100929-20 半干法电转缓冲液 

81210-200 Western 印迹膜封膜液 

81208-100 Western Blot抗体稀释液 

80813-50 Western印迹膜抗体清除剂 

80813-200 Western印迹膜抗体清除剂 

81223-100 增强型DAB显色试剂盒 

81224-100 BCIP/NBT底物显色试剂盒