大提柱式植物RNAout

大提柱式植物RNAout本实验方法的基本原理是，在高盐状态下，硅胶膜专一性地吸附DNA；而在低盐或水溶液状态下，DNA被洗脱下来。此法简便快捷，可在30分钟内同时提纯二十多个样品。从3～5ml培养过夜的含高拷贝质粒的菌液中可以获得10～20μg高纯度的质粒DNA，用于酶切、转化、DNA自动测序和手工测序等。

大提柱式植物RNAout是一种使用破壁酶(Lyticase)消化去除酵母细胞壁，然后采用一种新型的酵母质粒纯化柱实现从酵母细胞中进行小量质粒快速抽提的试剂盒。

1无需酚氯仿抽提，无需酒精沉淀，12个样品只需约1-1.5小时即可完成。

2试剂盒提供了破壁酶(Lyticase)，酵母收集后，加入Lyticase消化去除细胞壁，接着采用传3统碱裂法裂解细胞，然后将获得的上清液转移至结合柱结合DNA，经过离心快速洗涤，最后用洗脱液洗脱出酵母质粒DNA。

4由于采用了高浓度的破壁酶，无需再使用玻璃珠，可以避免因为玻璃珠的机械作用带来的酵母基因组DNA污染。

大提柱式植物RNAout纯化柱可以结合的质粒量的上限约为20微克。质粒DNA的产量依赖于酵母携带质粒的拷贝数，酵母菌株以及生长条件。通常酵母质粒的拷贝数较低，1.5-5ml培养过夜的酵母抽提获得的质粒DNA量约为1-3微克左右。高拷贝酵母质粒抽提时的得率会大大提高。抽提所得质粒的量与酵母培养浓度、质粒拷贝数、酵母品系等因素有关。

使用本试剂盒抽提得到的酵母质粒DNA可用于各种常规分子生物学实验，如转化、PCR、基于PCR的突变、体外转录、酶切、测序、文库筛选等。

大提柱式植物RNAout相关产品如下：

ZS304 5×tris-甘氨酸电泳缓冲液

ZS305-1 SDS-PAGE电泳液（10X）

ZS306 SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X)

ZS307 非变性PAGE蛋白上样缓冲液(5X)

ZS309 10%过硫酸铵

ZS310 30% 丙烯酰胺 (29:1)

ZS311 40% 丙烯酰胺 (39:1)

ZS312-1 0.5M DTT

ZS312-2 0.5M DTT

ZS313 10% SDS(SDS-PAGE电泳)

ZS314 TEMED

ZS315 1M Tris-HCl,pH6.8

ZS316 1.5M Tris-HCl,pH8.8

ZS401 Western转膜缓冲液 （20x）

ZS402 Western一/二抗稀释液

ZS403 Western封闭液(BSA型）

ZS404 脱脂奶粉

ZS405 Western洗涤液

ZS406 Western一抗二抗去除液

ZS407 BCIP工作液 50mg/ml

ZS408 NBT工作液 50mg/ml

ZS409 10% Sodium Azide (叠氮钠)

ZS501 胰酶细胞消化液

ZS502 L-Glutamine(100X)

ZS503 Hanks' Balanced Salt Solution

ZS504 7.5% NaHCO3溶液

ZS506 LB (premixed LB，粉末可配500ml/瓶)

ZS507 青霉素-链霉素溶液(100X)