伊红美蓝琼脂(EMB)原 理:酪胨和酵母浸出粉提供碳氮源、维生素和生长因子;葡萄糖提供可发酵有糖类更利于生长;氯化钠维持均衡的渗透压;硫乙醇酸钠和L—胱氨酸能有效降低氧化还原电位,防止过氧化物的积累对某些菌产生毒性,同时其硫氢基团有钝化含砷、汞及其它重金属防腐剂的抑菌作用;少量琼脂的凝固作用可防止二氧化碳、氧气和还原产物的扩散;刃天青是氧化还原指示剂,氧化状态呈粉红色,还原状态无色。
伊红美蓝琼脂(EMB)用 途:用于培养需氧菌、微需氧菌和厌氧菌,还用于药品生物制品的无菌试验,及食品中产气荚膜羧菌的厌氧培养。
仪器与试剂 :
1.托盘天平、消毒锅、电冰箱、1000ml三角瓶、500ml量筒、玻璃棒、棉塞、牛皮纸、线绳、培养皿。
2.蒸馏水、营养琼脂、75%酒精。
伊红美蓝琼脂(EMB)操作方法
1.称取营养琼脂17克,于1000ml三角瓶内,加入500ml纯化水,充分搅拌后,塞上棉塞, 2.置消毒锅内,于115℃高压灭菌30分钟,取出放置至室温后,放入冰箱,备用(冰箱温度控制在1-4℃)。
3.使用时从冰箱取出,放置室温后,置水浴中加热,使融,全部融化后取出,放置约45℃时使用。
4.使用时,用75%乙醇擦瓶子外围,打开牛皮纸包扎外壳,在火焰附近慢慢旋下棉塞,左手拿培养皿,右手拿三角瓶,慢慢倾倒至培养皿中,每皿注入约
15ml完毕后,将棉塞在火焰上方烧烤数秒,立即塞入瓶口,包上牛皮纸外层,用线绳扎好,留下次使用。(此瓶培养基只允许使用两次,且每次首先倾注一个空白平皿作为对照培养)。
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