尿蛋白定量测试盒实验步骤
HRP的制备
尿蛋白定量测试盒水提取:称取5kg用水冲刷干净的鲜辣根(辣根皮中亦含有丰富的HRP),用菜刀切成小碎块,在绞肉机中绞碎1~2次。碎渣浆用1倍体积的水低温下搅拌提取过夜(亦可采用高速抽提法)。次日用甩干机(或离心机)甩干,收集滤液,碎渣再用1/4倍体积水浸泡提取1次,合并2次滤液,测得总体积。
尿蛋白定量测试盒硫酸铵分级分离:在不断搅拌下,每1000mL滤液中慢慢加入226g硫酸铵粉末(相当于0.40饱和度,0℃),大约在1~2h内加完,置冷室中放置过夜。次日将上清液小心地用虹吸管移出,下面混浊液以3 000r/min离心15min,弃沉淀,合并上清液。再按每1000mL上清液加258g硫酸铵粉末(0.8饱和度)随加随搅拌,当硫酸铵全部溶解后,置冷室过夜。次日,虹吸出上清液,沉淀部分在冰冻离心机中以13000r/min离心20min,弃去上清液,收集沉淀。将沉淀悬浮于100~150mL蒸馏水中(加水量要使沉淀全部溶解为止),分装于透析袋内,放在流动自来水中进行透析1~2天,直到硫酸铵透析完毕为止(可用5%乙酸钡溶液或奈氏试剂进行检查)。然后改换成用蒸馏水透析,中间更换2~3次,用0.1mol/L硝酸银溶液检查透析外液无氯离子为止。将透析液合并,在冰冻离心机中以4 000r/min离心15min,弃去沉淀,量上清液的体积。
尿蛋白定量测试盒丙酮分级分离:将上清液倒入烧杯并置冰盐浴中,在不断搅拌下,用细滴管沿杯壁加入1倍体积预冷至-15℃的丙酮,放置片刻,在冰冻离心机中以4000r/min离心15min,弃去沉淀。上清液再加入0.8体积(按原上清液体积)-15℃丙酮,(操作同上),静置后,在冰冻离心机中离心收集沉淀。将沉淀溶于少量蒸馏水中,透析除去丙酮。可得RZ值近于1的酶溶液。
尿蛋白定量测试盒精制:将上步酶液适当稀释,滴加1mol/L硫酸锌溶液,使酶液中锌离子浓度为10 -3 mol/L,5 000r/min离心10min,得上清液。再将沉淀用少量蒸馏水洗涤,离心,洗液与清液合并,分装于透析袋内,用水透析除盐,用微孔滤膜过滤,进行真空冰冻干燥(约得20mg),产品呈米黄色纤维状松软物,HRP产品的RZ值可达3.0左右,置真空干燥器中低温保存。
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HZD440Hu 中文名称:人肌球蛋白ⅦB(MYO7B)ELISA试剂盒 英文名称:for Myosin VIIB (MYO7B) ELISAkit 规格:48T/96T
HZD449Hu 中文名称:人原肌球蛋白3(TPM3)ELISA试剂盒 英文名称:for Tropomyosin 3 (TPM3) ELISAkit 规格:48T/96T
HZD493Hu 中文名称:人5-羟色胺受体4(HTR4)ELISA试剂盒 英文名称:for 5-Hydroxytryptamine Receptor 4 (HTR4) ELISAkit 规格:48T/96T
HZD496Hu 中文名称:人乙酰复合胺-O-甲基转移酶(ASMT)ELISA试剂盒 英文名称:for Acetylserotonin-O-Methyltransferase (ASMT) ELISAkit 规格:48T/96T
HZD757Hu 中文名称:人谷光甘肽合成酶(GSS)ELISA试剂盒 英文名称:for Glutathione Synthetase (GSS) ELISAkit 规格:48T/96T
HZD800Hu 中文名称:人拓扑异构酶Ⅲ(TOP3)ELISA试剂盒 英文名称:for Topoisomerase III (TOP3) ELISAkit 规格:48T/96T
HZD842Hu 中文名称:人磷脂酶D2(PLD2)ELISA试剂盒 英文名称:for Phospholipase D2 (PLD2) ELISAkit 规格:48T/96T
HZD861Hu 中文名称:人磷酸丝氨酸转氨酶1(PSAT1)ELISA试剂盒 英文名称:for Phosphoserine Aminotransferase 1 (PSAT1) ELISAkit 规格:48T/96T
HZD981Hu 中文名称:人二甲基精氨酸二甲胺水解酶2(DDAH2)ELISA试剂盒 英文名称:for Dimethylarginine Dimethylaminohydrolase 2 (DDAH2) ELISAkit 规格:48T/96T
HZE039Hu 中文名称:人围脂滴蛋白5(PLIN5)ELISA试剂盒 英文名称:for Perilipin 5 (PLIN5) ELISAkit 规格:48T/96T
HZE040Hu 中文名称:人围脂滴蛋白4(PLIN4)ELISA试剂盒 英文名称:for Perilipin 4 (PLIN4) ELISAkit 规格:48T/96T
HZE041Hu 中文名称:人围脂滴蛋白3(PLIN3)ELISA试剂盒 英文名称:for Perilipin 3 (PLIN3) ELISAkit 规格:48T/96T
HZE111Hu 中文名称:人肝配蛋白A5(EFNA5)ELISA试剂盒 英文名称:for Ephrin A5 (EFNA5) ELISAkit 规格:48T/96T
HZE175Hu 中文名称:人脂肪酶H(LIPH)ELISA试剂盒 英文名称:for Lipase H (LIPH) ELISAkit 规格:48T/96T
HZE211Hu 中文名称:人弹性蛋白酶3A(ELA3A)ELISA试剂盒 英文名称:for Elastase 3A (ELA3A) ELISAkit 规格:48T/96T
HZE213Hu 中文名称:人糜蛋白酶原B1(CTRB1)ELISA试剂盒 英文名称:for Chymotrypsinogen B1 (CTRB1) ELISAkit 规格:48T/96T
HZE214Hu 中文名称:人糜蛋白酶原B2(CTRB2)ELISA试剂盒 英文名称:for Chymotrypsinogen B2 (CTRB2) ELISAkit 规格:48T/96T
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