凝血酶时间(TT)

凝血酶时间(TT)实验步骤

HRP的制备

凝血酶时间(TT)水提取：称取5kg用水冲刷干净的鲜辣根(辣根皮中亦含有丰富的HRP)，用菜刀切成小碎块，在绞肉机中绞碎1～2次。碎渣浆用1倍体积的水低温下搅拌提取过夜(亦可采用高速抽提法)。次日用甩干机(或离心机)甩干，收集滤液，碎渣再用1/4倍体积水浸泡提取1次，合并2次滤液，测得总体积。

凝血酶时间(TT)硫酸铵分级分离：在不断搅拌下，每1000mL滤液中慢慢加入226g硫酸铵粉末(相当于0.40饱和度，0℃)，大约在1~2h内加完，置冷室中放置过夜。次日将上清液小心地用虹吸管移出，下面混浊液以3 000r/min离心15min，弃沉淀，合并上清液。再按每1000mL上清液加258g硫酸铵粉末(0.8饱和度)随加随搅拌，当硫酸铵全部溶解后，置冷室过夜。次日，虹吸出上清液，沉淀部分在冰冻离心机中以13000r/min离心20min，弃去上清液，收集沉淀。将沉淀悬浮于100~150mL蒸馏水中(加水量要使沉淀全部溶解为止)，分装于透析袋内，放在流动自来水中进行透析1～2天，直到硫酸铵透析完毕为止(可用5%乙酸钡溶液或奈氏试剂进行检查)。然后改换成用蒸馏水透析，中间更换2~3次，用0.1mol/L硝酸银溶液检查透析外液无氯离子为止。将透析液合并，在冰冻离心机中以4 000r/min离心15min，弃去沉淀，量上清液的体积。

凝血酶时间(TT)丙酮分级分离：将上清液倒入烧杯并置冰盐浴中，在不断搅拌下，用细滴管沿杯壁加入1倍体积预冷至-15℃的丙酮，放置片刻，在冰冻离心机中以4000r/min离心15min，弃去沉淀。上清液再加入0.8体积(按原上清液体积)-15℃丙酮，(操作同上)，静置后，在冰冻离心机中离心收集沉淀。将沉淀溶于少量蒸馏水中，透析除去丙酮。可得RZ值近于1的酶溶液。

凝血酶时间(TT)精制：将上步酶液适当稀释，滴加1mol/L硫酸锌溶液，使酶液中锌离子浓度为10 -3 mol/L，5 000r/min离心10min，得上清液。再将沉淀用少量蒸馏水洗涤，离心，洗液与清液合并，分装于透析袋内，用水透析除盐，用微孔滤膜过滤，进行真空冰冻干燥(约得20mg)，产品呈米黄色纤维状松软物，HRP产品的RZ值可达3.0左右，置真空干燥器中低温保存。

hz-E12743 中文名称：大鼠雌激素(E)ELISA试剂盒 英文名称：Rat estrogen,E ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E12744 中文名称：大鼠血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA试剂盒 英文名称：Rat Vascuolar cell adhesion molecule 1,VCAM-1 ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E12745 中文名称：大鼠白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA试剂盒 英文名称：Rat Interleukin 8,IL-8 ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E12746 中文名称：大鼠脂联素(ADP)ELISA试剂盒 英文名称：Rat adiponectin,ADP ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E12747 中文名称：大鼠游离β绒毛膜促性腺激素(f-βCG)ELISA试剂盒 英文名称：Rat free chorionic gonadotropin,f-βCG ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E12748 中文名称：大鼠醛固酮(ALD)ELISA试剂盒 英文名称：Rat aldosterone,ALD ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E12749 中文名称：大鼠去甲肾上腺素(NA)ELISA试剂盒 英文名称：Rat Noradrenaline,NA ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E12750 中文名称：大鼠前列腺素F(PGF)ELISA试剂盒 英文名称：Rat Prostaglandin F,PG-F ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E12751 中文名称：大鼠前列腺素E1(PGE1)ELISA试剂盒 英文名称：Rat Prostaglandin E1,PG-E1 ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E12752 中文名称：大鼠皮质酮/肾上腺酮(CORT)ELISA试剂盒 英文名称：Rat Corticosterone,CORT ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E12753 中文名称：大鼠内皮素1(ET-1)ELISA试剂盒 英文名称：Rat Endothelin 1,ET-1 ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E12754 中文名称：大鼠血管舒缓激肽(BK)ELISA试剂盒 英文名称：Rat bradykinin,BK ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E12755 中文名称：大鼠抵抗素(Resistin)ELISA试剂盒 英文名称：Rat Resistin ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E12756 中文名称：大鼠催乳素(PRL)ELISA试剂盒 英文名称：Rat prolactin,PRL ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E12757 中文名称：大鼠促生长激素释放激素(GRH)ELISA试剂盒 英文名称：Rat growth hormone releasing hormone,GHRH ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E12758 中文名称：大鼠促肾上腺皮质激素(ACTH)ELISA试剂盒 英文名称：Rat adrencocorticotropic hormone,ACTH ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E12759 中文名称：大鼠促卵泡素(FSH)ELISA试剂盒 英文名称：Rat follicle-stimulating hormone,FSH ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E12760 中文名称：大鼠雌二醇受体(ER)ELISA试剂盒 英文名称：Rat Estradiol receptor,ER ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E12761 中文名称：大鼠前心钠肽(Pro-ANP)ELISA试剂盒 英文名称：Rat Big Endothelin,Big ET ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E12762 中文名称：大鼠大内皮素(Big ET)ELISA试剂盒 英文名称：Rat Big Endothelin,Big ET ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E12763 中文名称：大鼠迟现抗原(VLA)ELISA试剂盒 英文名称：Rat very late appearing antigen,VLA ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E12764 中文名称：大鼠降钙素(CT)ELISA试剂盒 英文名称：Rat Calcitonin,CT ELISAkit 规格：48T/96T