乙酰胆碱转移酶(ChAT)测试盒实验步骤
HRP的制备
乙酰胆碱转移酶(ChAT)测试盒水提取:称取5kg用水冲刷干净的鲜辣根(辣根皮中亦含有丰富的HRP),用菜刀切成小碎块,在绞肉机中绞碎1~2次。碎渣浆用1倍体积的水低温下搅拌提取过夜(亦可采用高速抽提法)。次日用甩干机(或离心机)甩干,收集滤液,碎渣再用1/4倍体积水浸泡提取1次,合并2次滤液,测得总体积。
乙酰胆碱转移酶(ChAT)测试盒硫酸铵分级分离:在不断搅拌下,每1000mL滤液中慢慢加入226g硫酸铵粉末(相当于0.40饱和度,0℃),大约在1~2h内加完,置冷室中放置过夜。次日将上清液小心地用虹吸管移出,下面混浊液以3 000r/min离心15min,弃沉淀,合并上清液。再按每1000mL上清液加258g硫酸铵粉末(0.8饱和度)随加随搅拌,当硫酸铵全部溶解后,置冷室过夜。次日,虹吸出上清液,沉淀部分在冰冻离心机中以13000r/min离心20min,弃去上清液,收集沉淀。将沉淀悬浮于100~150mL蒸馏水中(加水量要使沉淀全部溶解为止),分装于透析袋内,放在流动自来水中进行透析1~2天,直到硫酸铵透析完毕为止(可用5%乙酸钡溶液或奈氏试剂进行检查)。然后改换成用蒸馏水透析,中间更换2~3次,用0.1mol/L硝酸银溶液检查透析外液无氯离子为止。将透析液合并,在冰冻离心机中以4 000r/min离心15min,弃去沉淀,量上清液的体积。
乙酰胆碱转移酶(ChAT)测试盒丙酮分级分离:将上清液倒入烧杯并置冰盐浴中,在不断搅拌下,用细滴管沿杯壁加入1倍体积预冷至-15℃的丙酮,放置片刻,在冰冻离心机中以4000r/min离心15min,弃去沉淀。上清液再加入0.8体积(按原上清液体积)-15℃丙酮,(操作同上),静置后,在冰冻离心机中离心收集沉淀。将沉淀溶于少量蒸馏水中,透析除去丙酮。可得RZ值近于1的酶溶液。
乙酰胆碱转移酶(ChAT)测试盒精制:将上步酶液适当稀释,滴加1mol/L硫酸锌溶液,使酶液中锌离子浓度为10 -3 mol/L,5 000r/min离心10min,得上清液。再将沉淀用少量蒸馏水洗涤,离心,洗液与清液合并,分装于透析袋内,用水透析除盐,用微孔滤膜过滤,进行真空冰冻干燥(约得20mg),产品呈米黄色纤维状松软物,HRP产品的RZ值可达3.0左右,置真空干燥器中低温保存。
hz-E11546 中文名称:人MAX二聚化蛋白1(mxd1)ELISA试剂盒 英文名称:Human MAX dimerization protein 1,mxd1 ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E11547 中文名称:人水闸蛋白14(CLDN14)ELISA试剂盒 英文名称:Human claudin 14,CLDN14 ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E11548 中文名称:人可溶性半乳糖苷结合凝集素3(Lgals3)ELISA试剂盒 英文名称:Human lectin-galactose binding-soluble 3,Lgals3 ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E11549 中文名称:人主要穹窿蛋白(MVP)ELISA试剂盒 英文名称:Human major vault protein,MVP ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E11550 中文名称:人泛素蛋白D(UBD)ELISA试剂盒 英文名称:Human ubiquitin D,UBD ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E11551 中文名称:人toll样受体2(TLR2)ELISA试剂盒 英文名称:Human toll-like receptor 2,TLR2 ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E11552 中文名称:人青少年2型血色素沉着症/幼年型血色病相关蛋白2(HFE2)ELISA试剂盒 英文名称:Human hemochromatosis type 2/uvenile-uman homolog,HFE2 LISA kit规格:48T/96T 规格:48T/96T
hz-E11553 中文名称:人卷曲蛋白8(FZD8)ELISA试剂盒 英文名称:Human frizzled homolog 8,FZD8 ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E11554 中文名称:人蜗中文名称:牛同源物2(SNAI2)ELISA试剂盒 英文名称:Human snail homolog 2,SNAI2 ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E11555 中文名称:人高尔基蛋白73(GP-73)ELISA试剂盒 英文名称:Human golgi protein 73,GP-73 ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E11556 中文名称:人TU3A蛋白(TU3A)ELISA试剂盒 英文名称:Human TU3A Protein ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E11557 中文名称:人电子转移黄素蛋白β肽(ETFB)ELISA试剂盒 英文名称:Human electron-transfer-flavoprotein beta polypeptide,ETFB ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E11558 中文名称:人皮肤蛋白(DPT)ELISA试剂盒 英文名称:Human dermato-pontin,DPT ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E11559 中文名称:人可溶性蛋白185(sp185/HER-2)ELISA试剂盒 英文名称:Human soluble protein 185,sp185/HER-2 ELISAkit 规格:48T/96T
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