羟脯氨酸(不含前处理)

羟脯氨酸(不含前处理)实验步骤

HRP的制备

羟脯氨酸(不含前处理)水提取：称取5kg用水冲刷干净的鲜辣根(辣根皮中亦含有丰富的HRP)，用菜刀切成小碎块，在绞肉机中绞碎1～2次。碎渣浆用1倍体积的水低温下搅拌提取过夜(亦可采用高速抽提法)。次日用甩干机(或离心机)甩干，收集滤液，碎渣再用1/4倍体积水浸泡提取1次，合并2次滤液，测得总体积。

羟脯氨酸(不含前处理)硫酸铵分级分离：在不断搅拌下，每1000mL滤液中慢慢加入226g硫酸铵粉末(相当于0.40饱和度，0℃)，大约在1~2h内加完，置冷室中放置过夜。次日将上清液小心地用虹吸管移出，下面混浊液以3 000r/min离心15min，弃沉淀，合并上清液。再按每1000mL上清液加258g硫酸铵粉末(0.8饱和度)随加随搅拌，当硫酸铵全部溶解后，置冷室过夜。次日，虹吸出上清液，沉淀部分在冰冻离心机中以13000r/min离心20min，弃去上清液，收集沉淀。将沉淀悬浮于100~150mL蒸馏水中(加水量要使沉淀全部溶解为止)，分装于透析袋内，放在流动自来水中进行透析1～2天，直到硫酸铵透析完毕为止(可用5%乙酸钡溶液或奈氏试剂进行检查)。然后改换成用蒸馏水透析，中间更换2~3次，用0.1mol/L硝酸银溶液检查透析外液无氯离子为止。将透析液合并，在冰冻离心机中以4 000r/min离心15min，弃去沉淀，量上清液的体积。

羟脯氨酸(不含前处理)丙酮分级分离：将上清液倒入烧杯并置冰盐浴中，在不断搅拌下，用细滴管沿杯壁加入1倍体积预冷至-15℃的丙酮，放置片刻，在冰冻离心机中以4000r/min离心15min，弃去沉淀。上清液再加入0.8体积(按原上清液体积)-15℃丙酮，(操作同上)，静置后，在冰冻离心机中离心收集沉淀。将沉淀溶于少量蒸馏水中，透析除去丙酮。可得RZ值近于1的酶溶液。

羟脯氨酸(不含前处理)精制：将上步酶液适当稀释，滴加1mol/L硫酸锌溶液，使酶液中锌离子浓度为10 -3 mol/L，5 000r/min离心10min，得上清液。再将沉淀用少量蒸馏水洗涤，离心，洗液与清液合并，分装于透析袋内，用水透析除盐，用微孔滤膜过滤，进行真空冰冻干燥(约得20mg)，产品呈米黄色纤维状松软物，HRP产品的RZ值可达3.0左右，置真空干燥器中低温保存。

hz-E11146 中文名称：人肌钙蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA试剂盒 英文名称：Human Troponin Ⅰ,Tn-Ⅰ ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E11147 中文名称：人血清淀粉样蛋白A(SAA)ELISA试剂盒 英文名称：Human Serum amyloid A,SAA ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E11148 中文名称：人热休克蛋白60(Hsp-60)ELISA试剂盒 英文名称：Human Heat Shock Protein 60,HSP-60 ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E11149 中文名称：人热休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA试剂盒 英文名称：Human Heat Shock Protein glycoprotein 96,HSP gp96 ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E11150 中文名称：人心肌营养素1(CT-1)ELISA试剂盒 英文名称：Human cardiotrophln 1,CT-1 ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E11151 中文名称：人铜蓝蛋白(CP/CER)ELISA试剂盒 英文名称：Human Ceruloplasmin,CP/CER ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E11152 中文名称：人热休克蛋白90(HSP-90)ELISA试剂盒 英文名称：Human Heat Shock Protein 90,HSP-90 ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E11153 中文名称：人热休克蛋白70(HSP-70)ELISA试剂盒 英文名称：Human Heat Shock Protein 70,HSP-70 ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E11154 中文名称：人热休克蛋白40(HSP-40)ELISA试剂盒 英文名称：Human Heat Shock Protein 40,HSP-40 ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E11155 中文名称：人热休克蛋白20(HSP-20)ELISA试剂盒 英文名称：Human Heat Shock Protein 20,HSP-20 ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E11156 中文名称：人肌球蛋白(MYS)ELISA试剂盒 英文名称：Human Myosin,MYS ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E11157 中文名称：人凝溶胶蛋白(GS)ELISA试剂盒 英文名称：Human Gelsolin,GS ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E11158 中文名称：人C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒 英文名称：Human C-Reactive Protein,CRP ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E11159 中文名称：人醛固酮(ALD)ELISA试剂盒 英文名称：Human aldosterone,ALD ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E11160 中文名称：人肌红蛋白(MYO/MB)ELISA试剂盒 英文名称：Human Myoglobin,MYO/MB ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E11161 中文名称：人心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA试剂盒 英文名称：Human cardiac troponin Ⅰ,cTn-ⅠELISAkit 规格：48T/96T

hz-E11162 中文名称：人血管生成素受体/含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪氨酸激酶1(Tie1)ELISA试剂盒 英文名称：Human tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 1,Tie1 ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E11163 中文名称：人血管生成素2(ANG-2)ELISA试剂盒 英文名称：Human Angiopoietin 2,ANG-2 ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E11164 中文名称：人血管生成素1(ANG-1)ELISA试剂盒 英文名称：Human Angiopoietin 1,ANG-1 ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E11165 中文名称：人血管生长素(ANG)ELISA试剂盒 英文名称：Human Angiogenin,ANG ELISAkit 规格：48T/96T