一氧化氮(NO)测试盒(硝酸还原酶法)实验步骤
HRP的制备
一氧化氮(NO)测试盒(硝酸还原酶法)水提取:称取5kg用水冲刷干净的鲜辣根(辣根皮中亦含有丰富的HRP),用菜刀切成小碎块,在绞肉机中绞碎1~2次。碎渣浆用1倍体积的水低温下搅拌提取过夜(亦可采用高速抽提法)。次日用甩干机(或离心机)甩干,收集滤液,碎渣再用1/4倍体积水浸泡提取1次,合并2次滤液,测得总体积。
一氧化氮(NO)测试盒(硝酸还原酶法)硫酸铵分级分离:在不断搅拌下,每1000mL滤液中慢慢加入226g硫酸铵粉末(相当于0.40饱和度,0℃),大约在1~2h内加完,置冷室中放置过夜。次日将上清液小心地用虹吸管移出,下面混浊液以3 000r/min离心15min,弃沉淀,合并上清液。再按每1000mL上清液加258g硫酸铵粉末(0.8饱和度)随加随搅拌,当硫酸铵全部溶解后,置冷室过夜。次日,虹吸出上清液,沉淀部分在冰冻离心机中以13000r/min离心20min,弃去上清液,收集沉淀。将沉淀悬浮于100~150mL蒸馏水中(加水量要使沉淀全部溶解为止),分装于透析袋内,放在流动自来水中进行透析1~2天,直到硫酸铵透析完毕为止(可用5%乙酸钡溶液或奈氏试剂进行检查)。然后改换成用蒸馏水透析,中间更换2~3次,用0.1mol/L硝酸银溶液检查透析外液无氯离子为止。将透析液合并,在冰冻离心机中以4 000r/min离心15min,弃去沉淀,量上清液的体积。
一氧化氮(NO)测试盒(硝酸还原酶法)丙酮分级分离:将上清液倒入烧杯并置冰盐浴中,在不断搅拌下,用细滴管沿杯壁加入1倍体积预冷至-15℃的丙酮,放置片刻,在冰冻离心机中以4000r/min离心15min,弃去沉淀。上清液再加入0.8体积(按原上清液体积)-15℃丙酮,(操作同上),静置后,在冰冻离心机中离心收集沉淀。将沉淀溶于少量蒸馏水中,透析除去丙酮。可得RZ值近于1的酶溶液。
一氧化氮(NO)测试盒(硝酸还原酶法)精制:将上步酶液适当稀释,滴加1mol/L硫酸锌溶液,使酶液中锌离子浓度为10 -3 mol/L,5 000r/min离心10min,得上清液。再将沉淀用少量蒸馏水洗涤,离心,洗液与清液合并,分装于透析袋内,用水透析除盐,用微孔滤膜过滤,进行真空冰冻干燥(约得20mg),产品呈米黄色纤维状松软物,HRP产品的RZ值可达3.0左右,置真空干燥器中低温保存。
hz-E10801 中文名称:人环磷酰胺(CTX)ELISA试剂盒 英文名称:Human Cyclophosphamide,CTX ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E10802 中文名称:人1,3-二磷酸甘油酸(1,3-DPG)ELISA试剂盒 英文名称:Human 1,3-DisphosphoglyceRate,1,3-DPG ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E10803 中文名称:人1,5-脱水葡萄糖醇/1,5-脱水山梨(1,5-AG)ELISA试剂盒 英文名称:Human 1,5-anhydroglucitol,1,5-AG ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E10804 中文名称:人β羟丁酸(β-OHB)ELISA试剂盒 英文名称:Human Beta-Hydroxybutyric Acid,β-OHB ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E10805 中文名称:人高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)ELISA试剂盒 英文名称:Human High density lipoprotein cholesterol,HDL-C ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E10806 中文名称:人N端中段骨钙素(N-MID-OT)ELISA试剂盒 英文名称:Human N-MID Osteocalcin,N-MID-OT ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E10807 中文名称:人低密度脂蛋白受体相关蛋白6(LRP-6)ELISA试剂盒 英文名称:Human low-density lipoprotein-receptor-related protein,LRP-6 ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E10808 中文名称:人极低密度脂蛋白受体(VLDLR)ELISA试剂盒 英文名称:Human very low density lipoprotein receptor,VLDLR ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E10809 中文名称:人低密度脂蛋白受体(LDLR)ELISA试剂盒 英文名称:Human very low density lipoprotein receptor,VLDLR ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E10810 中文名称:人高密度脂蛋白(HDL)ELISA试剂盒 英文名称:Human High density lipoprotein,HDL ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E10811 中文名称:人α谷胱甘肽S转移酶(α-GST)ELISA试剂盒 英文名称:Human α-glutathione S-transferases,α-GST ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E10812 中文名称:人同型半胱氨酸(Hcy)ELISA试剂盒 英文名称:Human Homocysteic acid,Hcy ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E10813 中文名称:人游离脂肪酸(FFA)ELISA试剂盒 英文名称:Human free fatty acids,FFA ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E10814 中文名称:人骨粘连蛋白(ON)ELISA试剂盒 英文名称:Human osteonectin,ON ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E10815 中文名称:人叶酸(FA)ELISA试剂盒 英文名称:Human Folic acid,FA ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E10816 中文名称:人内毒素(ET)ELISA试剂盒 英文名称:Human endotoxin,ET ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E10817 中文名称:人过氧化物酶体增殖因子活化受体γ( PPAR-γ)ELISA试剂盒 英文名称:Human Peroxisome ProlifeRator-activated receptor γ,PPAR-γ ELISAkit 规格:48T/96T
hz-E10818 中文名称:人环孢素A(CsA)ELISA试剂盒 英文名称:Human Cyclosporine A,CsA ELISAkit 规格:48T/96T
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