硝酸还原酶测定试剂盒

硝酸还原酶测定试剂盒实验步骤

HRP的制备

硝酸还原酶测定试剂盒水提取：称取5kg用水冲刷干净的鲜辣根(辣根皮中亦含有丰富的HRP)，用菜刀切成小碎块，在绞肉机中绞碎1～2次。碎渣浆用1倍体积的水低温下搅拌提取过夜(亦可采用高速抽提法)。次日用甩干机(或离心机)甩干，收集滤液，碎渣再用1/4倍体积水浸泡提取1次，合并2次滤液，测得总体积。

硝酸还原酶测定试剂盒硫酸铵分级分离：在不断搅拌下，每1000mL滤液中慢慢加入226g硫酸铵粉末(相当于0.40饱和度，0℃)，大约在1~2h内加完，置冷室中放置过夜。次日将上清液小心地用虹吸管移出，下面混浊液以3 000r/min离心15min，弃沉淀，合并上清液。再按每1000mL上清液加258g硫酸铵粉末(0.8饱和度)随加随搅拌，当硫酸铵全部溶解后，置冷室过夜。次日，虹吸出上清液，沉淀部分在冰冻离心机中以13000r/min离心20min，弃去上清液，收集沉淀。将沉淀悬浮于100~150mL蒸馏水中(加水量要使沉淀全部溶解为止)，分装于透析袋内，放在流动自来水中进行透析1～2天，直到硫酸铵透析完毕为止(可用5%乙酸钡溶液或奈氏试剂进行检查)。然后改换成用蒸馏水透析，中间更换2~3次，用0.1mol/L硝酸银溶液检查透析外液无氯离子为止。将透析液合并，在冰冻离心机中以4 000r/min离心15min，弃去沉淀，量上清液的体积。

硝酸还原酶测定试剂盒丙酮分级分离：将上清液倒入烧杯并置冰盐浴中，在不断搅拌下，用细滴管沿杯壁加入1倍体积预冷至-15℃的丙酮，放置片刻，在冰冻离心机中以4000r/min离心15min，弃去沉淀。上清液再加入0.8体积(按原上清液体积)-15℃丙酮，(操作同上)，静置后，在冰冻离心机中离心收集沉淀。将沉淀溶于少量蒸馏水中，透析除去丙酮。可得RZ值近于1的酶溶液。

硝酸还原酶测定试剂盒精制：将上步酶液适当稀释，滴加1mol/L硫酸锌溶液，使酶液中锌离子浓度为10 -3 mol/L，5 000r/min离心10min，得上清液。再将沉淀用少量蒸馏水洗涤，离心，洗液与清液合并，分装于透析袋内，用水透析除盐，用微孔滤膜过滤，进行真空冰冻干燥(约得20mg)，产品呈米黄色纤维状松软物，HRP产品的RZ值可达3.0左右，置真空干燥器中低温保存。

hz-E10260 中文名称：人c-myc癌基因产物(c-myc)ELISA试剂盒 英文名称：Human c-myc Oncogene product,c-myc ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E10261 中文名称：人Smad1 ELISA试剂盒 英文名称：Human Mothers against decapentaplegic homolog 1,Smad1 ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E10262 中文名称：人Smad7 ELISA试剂盒 英文名称：Human Mothers against decapentaplegic homolog 7,Smad7 ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E10263 中文名称：人肿瘤相关抗原(TAA)ELISA试剂盒 英文名称：Human tumor-associated antigen,TAA ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E10264 中文名称：人TGF-β诱导早期基因1(TIEG1)ELISA试剂盒 英文名称：Human TGF-beta-inducible early response gene-1,TIEG1 ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E10265 中文名称：人肿瘤血管生长因子(TAF)ELISA试剂盒 英文名称：Human tumor angiogenesis factors,TAF ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E10266 中文名称：人细胞角蛋白20(CK-20)ELISA试剂盒 英文名称：Human cytokeRatin 20,CK-20 ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E10267 中文名称：人细胞角蛋白19(CK-19)ELISA试剂盒 英文名称：Human cytokeRatin 19,CK-19 ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E10268 中文名称：人细胞角蛋白18(CK-18)ELISA试剂盒 英文名称：Human cytokeRatin 18,CK-18 ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E10269 中文名称：人嗜铬蛋白A(CgA)ELISA试剂盒 英文名称：Human Chromogranin,CgA ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E10270 中文名称：人视网膜母细胞瘤抑制蛋白(pRB)ELISA试剂盒 英文名称：Human retinoblastoma tumor suppressor protein,pRB ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E10271 中文名称：人生长调节致癌基因α/黑素瘤生长刺激因子(GROα/CXCL1/MGSA)ELISA试剂盒 英文名称：Human growth-regulated oncogeneα/melanoma growth stimulating activity,GROα/MGSA ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E10272 中文名称：人成熟促进因子(MPF)ELISA试剂盒 英文名称：Human matuRation promoting factor,MPF ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E10273 中文名称：人去唾液酸糖蛋白受体(AGSPR)ELISA试剂盒 英文名称：Human asialoglyco protein receptor,AGSPR ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E10274 中文名称：人可溶性转铁蛋白受体(sTfR)ELISA试剂盒 英文名称：Human soluble transferrin receptor,sTfR ELISAkit 规格：48T/96T

hz-E10275 中文名称：人金属硫蛋白(MT)ELISA试剂盒 英文名称：Human Metallothionein,MT ELISAkit 规格：48T/96T