(1)人谷氨酰胺酰肽环转移酶(QPCT)检测试剂盒包被液的选择:一般选择ph9.6的碳酸盐缓冲液。但有时由于试验的需要,包被原的特殊性也可能采用中性的缓冲溶液来包。应注意以下原理:由于蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附结合的,靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间的作用,这种物理吸附是非特异性的,受蛋白质的分子量、等电点、浓度等的影响,大分子蛋白质较小分子蛋白质通常含有更多的疏水基团,故更易吸附到固相载体表面。具体的试验还要有坚固的理论外也要实践,看一下最终可不可以应用到自己试验当中去。常用的包被液除了刚才提到的pH9.6碳酸盐缓冲液,还有pH7.2的磷酸盐缓冲液和pH7-8的Tris-HCL缓冲液等等。
(2)人谷氨酰胺酰肽环转移酶(QPCT)检测试剂盒封闭:继包被之后用高浓度的无关蛋白质溶液再包被的过程。封闭就是让大量不相关的蛋白质充填这些空隙,从而排斥ELISA后的步骤中干扰物质的再吸附。常用封闭剂有:0.05%-0.5%的BSA;10%的小牛血清或1%明胶;脱脂奶粉,比较价廉,可以高浓度使用(5%-10%);还有一些稀有用到的各种动物血清(主要为了排除相似蛋白干扰)和酪蛋白等等。但最终选用什么,要依据试验具体来实践。
(3)人谷氨酰胺酰肽环转移酶(QPCT)检测试剂盒洗涤板:可以说在ELISA操作中,洗涤是最主要的关键技术。因为聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的,为达到分离游离的和结合的酶标记物的目的,清除残留在板孔中游离的物质,以及非特异性地吸附的干扰物质,在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。所以在洗板时会有一定误差,人为因素很大(当然有条件的用洗板机除外),洗的不彻底或串了孔,对如此灵敏的ELISA系统可是不小的影响。
(4)加抗体标本(和二抗):注意该换枪头时换枪头。标本稀释一般可用PBS稀释,也可用封闭液去稀释。如需加二抗,还要注意二抗的工作浓度,太高浪费,太低则着色浅。
(5)人谷氨酰胺酰肽环转移酶(QPCT)检测试剂盒显色:显色系统又很多,我们一开始做的时候,要选择适宜的显色系统。注意显色系统酶活性底物的保存HRP结合物加硫柳泵,AP结合物可加叠氮钠。
每次做尽量要把阴阳空三个对照做好,如出现问题也好分析。
hzA953Hu 人信号调节蛋白α(SIRPα)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Signal Regulatory Protein Alpha (SIRPa)
hzA947Hu 人信号调节蛋白γ(SIRPγ)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Signal Regulatory Protein Gamma (SIRPg)
hzA561Hu 人白血病抑制因子受体(LIFR)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Leukemia Inhibitory Factor ReHZptor (LIFR)
hzG790Hu 人Mdm2 p53结合蛋白同源物(MDM2)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Mdm2 p53 Binding Protein Homolog (MDM2)
hzK111Hu 人DNA修复蛋白RAD50(RAD50)检测试剂盒规格 ELISA Kit for DNA Repair Protein RAD50 (RAD50)
hzB405Hu 人补体成分1q受体(C1qR1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Complement Component 1, Q ReHZptor (C1qR1)
hzG480Hu 人毛透明蛋白(TCHH)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Trichohyalin (TCHH)
hzK505Hu 人抗肝素/血小板因子4抗体(Anti-HPF4)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Anti-Heparin/Platelet Factor 4 Antibodies (Anti-HPF4)
hzB324Hu 人钙调结合蛋白(CALD)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Caldesmon (CALD)
hzC223Hu 人辅肌动蛋白α4(ACTN4)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Actinin Alpha 4 (ACTN4)
hzG084Hu 人嘌呤能受体P2Y14(P2RY14)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Purinergic ReHZptor P2Y, G Protein Coupled 14 (P2RY14)
hzG120Hu 人Synerginγ蛋白(SYNRγ)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Synergin Gamma (SYNRg)
hzG711Hu 人G蛋白偶联受体109B(GPR109B)检测试剂盒规格 ELISA Kit for G Protein Coupled ReHZptor 109B (GPR109B)
hzG766Hu 人Crk样蛋白(CRKL)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Crk Like Protein (CRKL)
hzH463Hu 人Palmdelphin蛋白(PALMD)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Palmdelphin (PALMD)
hzJ245Hu 人DNA甲基转移酶3A(DNMT3A)检测试剂盒规格 ELISA Kit for DNA Methyltransferase 3A (DNMT3A)
hzR890Hu 人PRMT5协同因子(COPR5)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Cooperator Of PRMT5 (COPR5)
hzA348Hu 人组织蛋白酶A(CTSA)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Cathepsin A (CTSA)
hzA550Hu 人巨噬细胞炎性蛋白5(MIP5)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Macrophage Inflammatory Protein 5 (MIP5)
hzB639Hu 人谷氨酰胺酰肽环转移酶(QPCT)检测试剂盒人白介素12受体β1(IL2Rβ1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Interleukin 12 ReHZptor Beta 1 (IL12Rb1)
hzB545Hu 人蛋白酪氨酸磷酸酶受体J(PTPRJ)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Protein Tyrosine Phosphatase ReHZptor Type J (PTPRJ)
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