(1)人衰老关键蛋白1(FBLN1)检测试剂盒包被液的选择:一般选择ph9.6的碳酸盐缓冲液。但有时由于试验的需要,包被原的特殊性也可能采用中性的缓冲溶液来包。应注意以下原理:由于蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附结合的,靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间的作用,这种物理吸附是非特异性的,受蛋白质的分子量、等电点、浓度等的影响,大分子蛋白质较小分子蛋白质通常含有更多的疏水基团,故更易吸附到固相载体表面。具体的试验还要有坚固的理论外也要实践,看一下最终可不可以应用到自己试验当中去。常用的包被液除了刚才提到的pH9.6碳酸盐缓冲液,还有pH7.2的磷酸盐缓冲液和pH7-8的Tris-HCL缓冲液等等。
(2)人衰老关键蛋白1(FBLN1)检测试剂盒封闭:继包被之后用高浓度的无关蛋白质溶液再包被的过程。封闭就是让大量不相关的蛋白质充填这些空隙,从而排斥ELISA后的步骤中干扰物质的再吸附。常用封闭剂有:0.05%-0.5%的BSA;10%的小牛血清或1%明胶;脱脂奶粉,比较价廉,可以高浓度使用(5%-10%);还有一些稀有用到的各种动物血清(主要为了排除相似蛋白干扰)和酪蛋白等等。但最终选用什么,要依据试验具体来实践。
(3)人衰老关键蛋白1(FBLN1)检测试剂盒洗涤板:可以说在ELISA操作中,洗涤是最主要的关键技术。因为聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的,为达到分离游离的和结合的酶标记物的目的,清除残留在板孔中游离的物质,以及非特异性地吸附的干扰物质,在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。所以在洗板时会有一定误差,人为因素很大(当然有条件的用洗板机除外),洗的不彻底或串了孔,对如此灵敏的ELISA系统可是不小的影响。
(4)加抗体标本(和二抗):注意该换枪头时换枪头。标本稀释一般可用PBS稀释,也可用封闭液去稀释。如需加二抗,还要注意二抗的工作浓度,太高浪费,太低则着色浅。
(5)人衰老关键蛋白1(FBLN1)检测试剂盒显色:显色系统又很多,我们一开始做的时候,要选择适宜的显色系统。注意显色系统酶活性底物的保存HRP结合物加硫柳泵,AP结合物可加叠氮钠。
每次做尽量要把阴阳空三个对照做好,如出现问题也好分析。
hzP550Hu 人无翅型MMTV整合位点家族成员9B(WNT9B)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 9B (WNT9B)
hzP605Hu 人T-框蛋白21(TBX21)检测试剂盒规格 ELISA Kit for T-Box Protein 21 (TBX21)
hzP862Hu 人粘蛋白12(MUC12)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Mucin 12, HZll SurfaHZ Associated (MUC12)
hzQ641Hu 人棘皮动物微管关联蛋白样蛋白2(EML2)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Echinoderm Microtubule Associated Protein Like Protein 2 (EML2)
hzQ741Hu 人胎盘特异性蛋白9(PLAC9)检测试剂盒规格 ELISA Kit for PlaHZnta Specific Protein 9 (PLAC9)
hzT372Hu 人短腭肺鼻腔上皮癌关联蛋白2(SPLUNC2)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Short Palate, Lung And Nasal Epithelium Carcinoma Associated Protein 2 (SPLUNC2)
hzT373Hu 人短腭肺鼻腔上皮癌关联蛋白3(SPLUNC3)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Short Palate, Lung And Nasal Epithelium Carcinoma Associated Protein 3 (SPLUNC3)
hzA596Hu 人铜伴侣超氧化物歧化酶(SOD4)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Superoxide Dismutase, Copper Chaperone (SOD4)
hzA751Hu 人细胞程序性死亡蛋白1(PDCD1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Programmed HZll Death Protein 1 (PDCD1)
hzA755Hu 人肌球蛋白重链2(MYH2)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Myosin Heavy Chain 2, Skeletal Muscle, Adult (MYH2)
hzD321Hu 人20S-蛋白酶体(20S-PSM)检测试剂盒规格 ELISA Kit for 20S-Proteasome (20S-PSM)
hzD329Hu 人蛋白酶体亚基α1(PSMα1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Proteasome Subunit Alpha Type 1 (PSMa1)
hzD416Hu 人肌球蛋白重链4(MYH4)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Myosin Heavy Chain 4, Skeletal Muscle (MYH4)
hzD418Hu 人肌球蛋白重链7(MYH7)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Myosin Heavy Chain 7, Cardiac Muscle, Beta (MYH7)
hzD419Hu 人肌球蛋白重链6(MYH6)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Myosin Heavy Chain 6, Cardiac Muscle, Alpha (MYH6)
hzD486Hu 人5-羟色胺受体2A(HTR2A)检测试剂盒规格 ELISA Kit for 5-Hydroxytryptamine ReHZptor 2A (HTR2A)
hzD934Hu 人肿瘤坏死因子配体超家族成员9(TNFSF9)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Ligand Superfamily, Member 9 (TNFSF9)
hzD964Hu 人核受体相关蛋白1(NURR1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Nuclear ReHZptor Related Protein 1 (NURR1)
hzE478Hu 人睾丸阴离子转运蛋白1(TAT1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Testis Anion Transporter 1 (TAT1)
hzE801Hu 人AMPA离子能谷氨酸受体1(GRIA1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Glutamate ReHZptor, Ionotropic, AMPA 1 (GRIA1)
hzE802Hu 人衰老关键蛋白1(FBLN1)检测试剂盒人AMPA离子能谷氨酸受体2(GRIA2)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Glutamate ReHZptor, Ionotropic, AMPA 2 (GRIA2)
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