(1)人层黏连蛋白α5(LAMα5)检测试剂盒包被液的选择:一般选择ph9.6的碳酸盐缓冲液。但有时由于试验的需要,包被原的特殊性也可能采用中性的缓冲溶液来包。应注意以下原理:由于蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附结合的,靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间的作用,这种物理吸附是非特异性的,受蛋白质的分子量、等电点、浓度等的影响,大分子蛋白质较小分子蛋白质通常含有更多的疏水基团,故更易吸附到固相载体表面。具体的试验还要有坚固的理论外也要实践,看一下最终可不可以应用到自己试验当中去。常用的包被液除了刚才提到的pH9.6碳酸盐缓冲液,还有pH7.2的磷酸盐缓冲液和pH7-8的Tris-HCL缓冲液等等。
(2)人层黏连蛋白α5(LAMα5)检测试剂盒封闭:继包被之后用高浓度的无关蛋白质溶液再包被的过程。封闭就是让大量不相关的蛋白质充填这些空隙,从而排斥ELISA后的步骤中干扰物质的再吸附。常用封闭剂有:0.05%-0.5%的BSA;10%的小牛血清或1%明胶;脱脂奶粉,比较价廉,可以高浓度使用(5%-10%);还有一些稀有用到的各种动物血清(主要为了排除相似蛋白干扰)和酪蛋白等等。但最终选用什么,要依据试验具体来实践。
(3)人层黏连蛋白α5(LAMα5)检测试剂盒洗涤板:可以说在ELISA操作中,洗涤是最主要的关键技术。因为聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的,为达到分离游离的和结合的酶标记物的目的,清除残留在板孔中游离的物质,以及非特异性地吸附的干扰物质,在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。所以在洗板时会有一定误差,人为因素很大(当然有条件的用洗板机除外),洗的不彻底或串了孔,对如此灵敏的ELISA系统可是不小的影响。
(4)加抗体标本(和二抗):注意该换枪头时换枪头。标本稀释一般可用PBS稀释,也可用封闭液去稀释。如需加二抗,还要注意二抗的工作浓度,太高浪费,太低则着色浅。
(5)人层黏连蛋白α5(LAMα5)检测试剂盒显色:显色系统又很多,我们一开始做的时候,要选择适宜的显色系统。注意显色系统酶活性底物的保存HRP结合物加硫柳泵,AP结合物可加叠氮钠。
每次做尽量要把阴阳空三个对照做好,如出现问题也好分析。
hzC759Hu 人静止素Q6硫基氧化酶1(QSOX1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Quiescin Q6 Sulfhydryl Oxidase 1 (QSOX1)
hzC196Hu 人连接桥粒斑珠蛋白(JUP)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Junction Plakoglobin (JUP)
hzB160Hu 人抗增生抗体靶分子1(TAPA1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Target Of The Antiproliferative Antibody 1 (TAPA1)
hzP196Hu 人解整合素金属蛋白酶33(ADAM33)检测试剂盒规格 ELISA Kit for A Disintegrin And Metalloprotease 33 (ADAM33)
hzG669Hu 人氯离子通道辅助蛋白1(CLCA1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Chloride Channel AcHZssory 1 (CLCA1)
hzH142Hu 人丝氨酸肽酶抑制因子Kunitz型2(SPINT2)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Serine Peptidase Inhibitor Kunitz Type 2 (SPINT2)
hzH669Hu 人NADP依赖性苹果酶2(ME2)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Malic Enzyme 2, NADP+ Dependent, Mitochondrial (ME2)
hzE047Hu 人原钙黏素γA2(PCDHγA2)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Protocadherin Gamma A2 (PCDHgA2)
hzD016Hu 人心脏肌球蛋白结合蛋白C(MYBPC3)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Myosin Binding Protein C, Cardiac (MYBPC3)
hzL882Hu 人UL16结合蛋白2(ULBP2)检测试剂盒规格 ELISA Kit for UL16 Binding Brotein 2 (ULBP2)
hzL921Hu 人信号素4A(SEMA4A)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Semaphorin 4A (SEMA4A)
hzM373Hu 人Tolloid样蛋白1(TLL1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Tolloid Like Protein 1 (TLL1)
hzM893Hu 人含RNA结合冷休克域蛋白E1(CSDE1)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Cold Shock Domain Containing Protein E1, RNA Binding (CSDE1)
hzP710Hu 人C-型凝集素域家族11成员A(CLEC11A)检测试剂盒规格 ELISA Kit for C-Type Lectin Domain Family 11, Member A (CLEC11A)
hzQ421Hu 人丝氨酸蛋白酶23(PRSS23)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Protease, Serine 23 (PRSS23)
hzF416Hu 人巢蛋白2(NID2)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Nidogen 2 (NID2)
hzJ932Hu 人FlightlessⅠ同源物(FLIⅠ)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Flightless I Homolog (FLII)
hzG850Hu 人促泌素(SCGN)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Secretagogin (SCGN)
hzG474Hu 人多巴脱羧酶(DDC)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Dopa Decarboxylase (DDC)
hzA175Hu 人干扰素α4(IFNα4)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Interferon Alpha 4 (IFNa4)
hzD498Hu 人层黏连蛋白α5(LAMα5)检测试剂盒人运动神经元生存蛋白2(SMN2)检测试剂盒规格 ELISA Kit for Survival Of Motor Neuron 2, HZntromeric (SMN2)
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