人纤溶酶/抗纤溶酶复合体(PAP)检测试剂盒

人纤溶酶/抗纤溶酶复合体(PAP)检测试剂盒检测方法简单，灵敏度高，我个人觉得ELISA最适合检测血清或者培养上清的细胞因子、胰岛素、激素等分泌型的小分子蛋白的定量检测；病原体抗原的定性与定量；评估自己制备的血清抗体的效价等。好多客户有个误区，拿来一个指标就想当然地尝试用ELISA去检测，我还是建议多动脑，该检测活性的检测活性，该做western的做western。

1、人纤溶酶/抗纤溶酶复合体(PAP)检测试剂盒包被原的性质很重要，蛋白浓度，是否降解，这关系到你做出的抗体可不可以被其识别，所以保存抗原很重要，我做重组蛋白时，师兄都严格警告我一定要在冰浴下缓慢融化就是这个道理。还有有的包被原可能不是蛋白，对于生物素和脂类物质或小分子物质我们要事先对其改造再加以包被，我把方法简要的列出如下:①亲和素生物素:先亲和素先包被载体，加入生物素化的DNA，这种包被方法均匀、牢固，已扩大应用于各种抗原物质的定量测定。②脂类物质:可将其在有机溶剂(例如乙醇)中溶解后加入人纤溶酶/抗纤溶酶复合体(PAP)检测试剂盒板孔中，开盖置冰箱过夜或冷风吹干，待酒精挥发后，让脂质自然干固在固相表面。③小分子必须依靠和大的蛋白载体偶联后才能固定在固相载体上。

2、人纤溶酶/抗纤溶酶复合体(PAP)检测试剂盒包被液的选择，一般选择ph9.6的碳酸盐缓冲液。但有时由于试验的需要，包被原的特殊性也可能采用中性的缓冲溶液来包。应注意以下原理：由于蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附结合的，靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间的作用，这种物理吸附是非特异性的，受蛋白质的分子量、等电点、浓度等的影响，大分子蛋白质较小分子蛋白质通常含有更多的疏水基团，故更易吸附到固相载体表面。具体的试验还要有坚固的理论外也要实践，看一下最终可不可以应用到自己试验当中去。常用的包被液除了刚才提到的pH9.6碳酸盐缓冲液，还有pH7.2的磷酸盐缓冲液和pH7-8的Tris-HCL缓冲液等等。

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