温育是小鼠保护素(CD59)检测试剂盒测定中影响测定成败最为关键的一个因素。小鼠保护素(CD59)检测试剂盒作为一种固相免疫测定,抗原抗体的结合反应在固相上进行,要使液相中的抗原或抗体与固相上的特异抗体或抗原完全结合,必须在一定的温度条件下反应一定的时间。温育所需时间与温度成反比,即温度越高,则所需时间相对较短。最为常用的温育温度有37℃和室温,其次是43℃和2~8℃。
温育这一步是临床小鼠保护素(CD59)检测试剂盒测定中最容易出现问题的步骤。通常目前国内ELISA商品试剂盒的反应温育时间为37℃ 30分钟~1小时,进口ELISA试剂盒则通常为37℃ 1~2小时才能有较完全的结合,低于1小时,可能会影响测定下限。因此,关于温育,在实际测定操作中一定要注意以下几点:
(1)要保证在设定的温度下有足够的反应时间。一般来说,加完样本和/或反应试剂后,将微孔板从室温拿至水浴箱或温箱中时,孔内温度从室温升至37℃,需要一定的时间,尤其是在室温比较低以及非水浴的状态下,这段升温时间可能还比较长,而在临床实验室中,很少有人注意这个问题,通常是将微孔板一放入温箱即开始计时,这样就很容易造成实际测定中温育时间不够,弱阳性样本测不出来的问题。曾有一地处南方的血站同行提出了一个问题,就是在每一年的冬季总有那么一个多月的时间,在做HBsAg测定的室内质控中,测定由卫生部临床检验中心供应的1 ng/ml弱阳性样本时,总是测不出来,不知原因为何?这可能就与南方冬天室内温度较低有关,此时微孔板转入温箱后37℃温育时间不够,以致弱阳性样本测定为阴性。因此,为保证37℃下足够的温育时间,小鼠保护素(CD59)检测试剂盒临床实验室可自行确定本实验室不同季节(不同室温下)微孔板从室温拿至温箱后需要多长时间孔内温度才能达到37℃,从而适当延长板条在温箱中的放置时间。具体的做法是,用一小温度计放置板孔反应溶液中测量观察即可。
(2)温育温度的选择。在有的ELISA试剂盒的说明书中,指出温育温度可有两种,例如,一种是37℃下1小时,另一种则为43℃下45分钟。从免疫测定的抗原抗体反应的本质来看,在较低的温度下反应较长的时间最为完全。如2~8℃下反应24小时。较高的反应温度,由于分子运动的加怜惜,反应时间缩短,这一点对分子含量较多的强阳性样本的测定没有问题,但对分子含量少的弱阳性样本则有漏检的可能。因此,我们建议在临床小鼠保护素(CD59)检测试剂盒测定中尽量使用较低温育温度较长反应时间的条件。
(3)“边缘效应”的排除。以前在使用96孔板的ELISA测定中,常发现有“边缘效应”,即外周孔显色较中心孔深,产生这种“边缘效应”的原因可能为 96孔板周孔与中心孔表面或热力学特征的不同。但有研究证实在温育中的热力学梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身为不良热导体,在实验室的常规 ELISA测定中,将板从室温(通常在25℃左右)置于37℃温箱,板也升温时,在外周孔与中心孔之间可能存在一热力学梯度。因此使用水浴或在将反应溶液加入至板孔中时,将板和溶液均加热至温育温度(如37℃),就可以很容易地排除“边缘效应”,并且可提高测定的重复性。
总而言之,在临床小鼠保护素(CD59)检测试剂盒测定中,要保证好的测定效果,可采用下述简单办法来确保温育条件,即尽量采用水浴,温育中让微孔板浮于水面上,或将浸透水的沙布放入一大饭盒中成一湿盒,放于温箱中,这样就会因为板条孔底部直接与37℃水或湿布的接触,以及水浴箱或湿盒内的高温度,而使反应溶液的温度迅速与温室平衡。
hzB489Hu 人粘蛋白6(MUC6)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Mucin 6 (MUC6)
hzC885Hu 人突触足蛋白(SYNPO)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Synaptopodin (SYNPO)
hzA149Hu 人Ⅳ型胶原α1(COL4α1)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Collagen Type IV Alpha 1 (COL4a1)
hzC549Hu 人外皮蛋白(EVPL)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Envoplakin (EVPL)
hzA147Hu 人脂联素受体1(ADIPOR1)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Adiponectin ReHZptor 1 (ADIPOR1)
hzB791Hu 人成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor ReHZptor 1 (FGFR1)
hzC561Hu 人淋巴细胞胞浆蛋白1(LCP1)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Lymphocyte Cytosolic Protein 1 (LCP1)
hzC030Hu 人脑型肌酸激酶(CKB)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Creatine Kinase, Brain (CKB)
hzA523Hu 人血小板衍生生长因子AA(PDGFAA)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Platelet Derived Growth Factor AA (PDGFAA)
hzC450Hu 人细胞外基质蛋白1(ECM1)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for ExtraHZllular Matrix Protein 1 (ECM1)
hzB882Hu 人成纤维细胞生长因子10(FGF10)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 10 (FGF10)
hzA268Hu 人抗平滑肌抗体(ASMA)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Anti-Smooth Muscle Antibody (ASMA)
hzA274Hu 人胰岛素样生长因子结合蛋白6(IGFBP6)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein 6 (IGFBP6)
hzA273Hu 人抑制素结合蛋白(INHBP)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Inhibin Binding Protein (INHBP)
hzA272Hu 人转运蛋白1(TNPO1)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Transportin 1 (TNPO1)
hzA231Hu 人尿皮质素1(UCN1)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Urocortin 1 (UCN1)
hzD063Hu 人70kDa热休克蛋白8(HSPA8)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Heat Shock 70kDa Protein 8 (HSPA8)
hzD245Hu 人抗谷氨酸脱羧酶抗体(Anti-GAD)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Anti-Glutamic Acid Decarboxylase Antibodies (Anti-GAD)
hzA302Hu 人半乳糖凝集素2(GAL2)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Galectin 2 (GAL2)
hzA304Hu 人半乳糖凝集素4(GAL4)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Galectin 4 (GAL4)
hzA233Hu 人蛋白激酶Cη(PKCη)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Protein Kinase C Eta (PKCh)
hzC319Hu 人芳香酶(ARO)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Aromatase (ARO)
hzA257Eq 人Ⅱ型前胶原氨基端原肽(PⅡNT)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Procollagen II N-Terminal Propeptide (PIINP)
hzA308Hu 人半乳糖凝集素8(GAL8)ELISA试剂盒说明书 ELISA Kit for Galectin 8 (GAL8)
小鼠保护素(CD59)检测试剂盒 信息由上海沪震生物科技有限公司为您提供,如您想了解更多关于小鼠保护素(CD59)检测试剂盒 报价、型号、参数等信息,欢迎来电或留言咨询。除供应小鼠保护素(CD59)检测试剂盒 外,上海沪震生物科技有限公司还可为您提供Histone H3.1 (Ab-10) 抗体、IκB-α (Ab-32/36) 抗体、TYK2 (Ab-1054) 抗体等产品,公司有专业的客户服务团队,是您值得信赖的合作伙伴。