人布鲁氏菌抗体IgG(Brucella Ab IgG)ELISA试剂盒中加样须注意如下问题:
1. 吸取样品时,加样枪吸头不应黏附多余的液体;加样时不可90度向孔中滴加液体,这样会导致液体残留在吸头上,加样不准确!
2. 不要将吸头伸入孔中,一方面若接触孔底可能压弯吸头,另一方面可能会将孔中的液体吹起来,加样不准确!
正确的加样方法应为45度,吸头贴着孔壁加入,应注意:
1. 角度太小,会使液体残留在孔壁上,导致加样不准确!
2. 吸头应当贴着管壁和液面的交界处!
在目前的以HRP作为标记酶的商品ELISA试剂盒中,如以TMB为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以OPD为底物,则试剂盒提供OPD片剂或粉剂,临用前配制。一般商品试剂盒显色反应条件为37℃或室温反应15~30分钟。从理论上说,37℃30分钟才可以使HRP的底物催化反应完全,尽管在最初的10分钟内,人布鲁氏菌抗体IgG(Brucella Ab IgG)ELISA试剂盒绝大部份催化反应即可完成。因此,为使弱阳性样本孔能有充分的显色,建议在37℃下反应25~30分钟后,终止反应比色测定。
此外,在加入底物开始显色反应前,最好是先检查一下底物溶液的有效性,即可将A和B两种液各加一滴于清洁的空板孔或eppendorf管中,观察是否有显色出现,如有,则说明底物已变质。以OPD为底物,配好后应为无色,否则就不能使用。以TMB为底物,整个显色反应过程无需避光,而以OPD为底物,则需避光进行。关于TMB和OPD的显色反应特点及注意点可参考前面有关章节内容。显色反应完成后,加入酸终止反应,振荡混匀后即可进行下面的比色测定或肉眼判断结果。
1.3 正态分布及标准差 ELISA试验中,检验同一样本达20次以上时,就会发现这组数据(指测定结果的吸光值)人布鲁氏菌抗体IgG(Brucella Ab IgG)ELISA试剂盒分布在均值两侧,大部分集中在均值附近。如果以测定值为横坐标,以出现的频率为纵坐标作图,就可绘出一个呈钟形的曲线图。如图5-1,钟顶处为均值,其他值以均值为中心对称分布,这就是正态分布。 正态曲线以下的面积称概率,常用样本的均数(X)和标准差(SD)来表示,其计算方法如下: 均值、标准差和概率的关系如下: X±1SD,概率0.68 X±2SD,概率0.95 X±3SD,概率0.99 换言之,当ELSIA检测同一样本达一定次数后所得的一组数据,其中靠近均值(X)的±1SD范围内的数据,占该组数据的68%,在X±2SD范围内分布的数据占总体的95%,在X±3SD范围内分布的数据占总体的99%。当我们要求检验结果在X±2SD范围内为合格时,将有95%的数据可能合格。
优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条
件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。
本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试
剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出
准确的结果。
人布鲁氏菌抗体IgG(Brucella Ab IgG)ELISA试剂盒相关产品系列表:
HZA131Rb 兔转化生长因子β诱导蛋白(TGFβI)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta Induced Protein (TGFbI)
HZA130Rb 兔组织金属蛋白酶抑制因子4(TIMP4)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 4 (TIMP4)
HZA134Rb 兔肿瘤坏死因子β(TNFβ)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Beta (TNFb)
HZA061Rb 兔白介素15(IL15)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Interleukin 15 (IL15)
HZA223Rb 兔白介素1受体拮抗剂(IL1RA)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Interleukin 1 Receptor Antagonist (IL1RA)
HZA064Rb 兔白介素18(IL18)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Interleukin 18 (IL18)
HZA178Rb 兔α2-HS糖蛋白(αHSG)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Alpha-2-Heremans Schmid Glycoprotein (aHSG)
HZA164Rb 兔泛素(Ub)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Ubiquitin (Ub)
HZA227Rb 兔亲环素B(CYPB)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cyclophilin B (CYPB)
HZA874Rb 兔缓激肽(BK)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Bradykinin (BK)
HZA252Rb 兔载脂蛋白C1(APOC1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Apolipoprotein C1 (APOC1)
HZA267Rb 兔组织蛋白酶K(CTSK)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cathepsin K (CTSK)
HZA093Rb 兔巨噬细胞炎性蛋白1β(MIP1β)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Macrophage Inflammatory Protein 1 Beta (MIP1b)
HZA277Rb 兔间隙连接蛋白43(CX43)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Connexin 43 (CX43)
HZA284Rb 兔肝素辅因子Ⅱ(HCⅡ)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Heparin Cofactor II (HCII)
HZA304Rb 兔半乳糖凝集素4(GAL4)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Galectin 4 (GAL4)
HZA295Rb 兔谷胱甘肽过氧化酶1(GPX1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Glutathione Peroxidase 1 (GPX1)
HZA010Rb 兔结缔组织生长因子(CTGF)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Connective Tissue Growth Factor (CTGF)
HZA013Rb 兔骨成型蛋白2(BMP2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Bone Morphogenetic Protein 2 (BMP2)
HZA014Rb 兔骨成型蛋白4(BMP4)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Bone Morphogenetic Protein 4 (BMP4)
HZA021Rb 兔睫状神经营养因子(CNTF)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Ciliary Neurotrophic Factor (CNTF)
HZA019Rb 兔白介素8受体α(IL8Rα)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Interleukin 8 Receptor Alpha (IL8Ra)
HZA235Rb 兔补体1抑制因子(C1INH)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Complement 1 Inhibitor (C1INH)
HZB472Rb 兔碱性磷酸酶(ALP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Alkaline Phosphatase (ALP)
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