人类嗜T淋巴细胞Ⅰ型病毒(HTLV-Ⅰ)ELISA试剂盒中加样须注意如下问题:
1. 吸取样品时,加样枪吸头不应黏附多余的液体;加样时不可90度向孔中滴加液体,这样会导致液体残留在吸头上,加样不准确!
2. 不要将吸头伸入孔中,一方面若接触孔底可能压弯吸头,另一方面可能会将孔中的液体吹起来,加样不准确!
正确的加样方法应为45度,吸头贴着孔壁加入,应注意:
1. 角度太小,会使液体残留在孔壁上,导致加样不准确!
2. 吸头应当贴着管壁和液面的交界处!
在目前的以HRP作为标记酶的商品ELISA试剂盒中,如以TMB为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以OPD为底物,则试剂盒提供OPD片剂或粉剂,临用前配制。一般商品试剂盒显色反应条件为37℃或室温反应15~30分钟。从理论上说,37℃30分钟才可以使HRP的底物催化反应完全,尽管在最初的10分钟内,人类嗜T淋巴细胞Ⅰ型病毒(HTLV-Ⅰ)ELISA试剂盒绝大部份催化反应即可完成。因此,为使弱阳性样本孔能有充分的显色,建议在37℃下反应25~30分钟后,终止反应比色测定。
此外,在加入底物开始显色反应前,最好是先检查一下底物溶液的有效性,即可将A和B两种液各加一滴于清洁的空板孔或eppendorf管中,观察是否有显色出现,如有,则说明底物已变质。以OPD为底物,配好后应为无色,否则就不能使用。以TMB为底物,整个显色反应过程无需避光,而以OPD为底物,则需避光进行。关于TMB和OPD的显色反应特点及注意点可参考前面有关章节内容。显色反应完成后,加入酸终止反应,振荡混匀后即可进行下面的比色测定或肉眼判断结果。
1.3 正态分布及标准差 ELISA试验中,检验同一样本达20次以上时,就会发现这组数据(指测定结果的吸光值)人类嗜T淋巴细胞Ⅰ型病毒(HTLV-Ⅰ)ELISA试剂盒分布在均值两侧,大部分集中在均值附近。如果以测定值为横坐标,以出现的频率为纵坐标作图,就可绘出一个呈钟形的曲线图。如图5-1,钟顶处为均值,其他值以均值为中心对称分布,这就是正态分布。 正态曲线以下的面积称概率,常用样本的均数(X)和标准差(SD)来表示,其计算方法如下: 均值、标准差和概率的关系如下: X±1SD,概率0.68 X±2SD,概率0.95 X±3SD,概率0.99 换言之,当ELSIA检测同一样本达一定次数后所得的一组数据,其中靠近均值(X)的±1SD范围内的数据,占该组数据的68%,在X±2SD范围内分布的数据占总体的95%,在X±3SD范围内分布的数据占总体的99%。当我们要求检验结果在X±2SD范围内为合格时,将有95%的数据可能合格。
优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条
件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。
本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试
剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出
准确的结果。
人类嗜T淋巴细胞Ⅰ型病毒(HTLV-Ⅰ)ELISA试剂盒相关产品系列表:
HZJ374Mu 小鼠几丁质酶1(CHIT1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Chitinase 1 (CHIT1)
HZD206Mu 小鼠EB病毒诱导蛋白3(EBI3)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Epstein Barr Virus Induced Protein 3 (EBI3)
HZB593Mu 小鼠淋巴细胞抗原75(LY75)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Lymphocyte Antigen 75 (LY75)
HZL920Mu 小鼠信号素3E(SEMA3E)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Semaphorin 3E (SEMA3E)
HZC843Mu 小鼠Sideroflexin 1蛋白(SFXN1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Sideroflexin 1 (SFXN1)
HZK247Mu 小鼠SRC/FGR/YES相关FYN癌基因(FYN)ELISA试剂盒 ELISA Kit for FYN Oncogene Related To SRC/FGR/YES (FYN)
HZJ447Mu 小鼠染色质装配因子1亚基B(CHAF1B)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Chromatin Assembly Factor 1, Subunit B (CHAF1B)
HZL761Mu 小鼠氨酰tRNA合成酶复合多功能相互作用蛋白1(AIMP1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Aminoacyl tRNA Synthetase Complex Interacting Multifunctional Protein 1 (AIMP1)
HZQ088Mu 小鼠Dickkopf相关蛋白4(DKK4)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Dickkopf Related Protein 4 (DKK4)
HZL507Mu 小鼠序列相似家族3成员B(FAM3B)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Family With Sequence Similarity 3, Member B (FAM3B)
HZE707Mu 小鼠微管蛋白β1(TUBβ1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Tubulin Beta 1 (TUBb1)
HZJ121Mu 小鼠F-框亮氨酸丰富重复蛋白3(FBXL3)ELISA试剂盒 ELISA Kit for F-Box And Leucine Rich Repeat Protein 3 (FBXL3)
HZC470Mu 小鼠脂肪酸合酶(FASN)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Fatty Acid Synthase (FASN)
HZC852Mu 小鼠精胺氧化酶(SMOX)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Spermine Oxidase (SMOX)
HZH138Mu 小鼠丝氨酸棕榈酰转移酶长链碱性亚基1(SPTLC1)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Serine Palmitoyltransferase, Long Chain Base Subunit 1 (SPTLC1)
HZJ337Mu 小鼠软骨关联蛋白(CRTAP)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Cartilage Associated Protein (CRTAP)
HZL621Mu 小鼠白介素1家族成员9(IL1F9)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Interleukin 1 Family, Member 9 (IL1F9)
HZG383Mu 小鼠氢/钾离子交换ATP酶α肽(ATP4α)ELISA试剂盒 ELISA Kit for ATPase, H+/K+ Exchanging Alpha Polypeptide (ATP4a)
HZB707Mu 小鼠髓分化因子88(MyD88)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Myeloid Differentiation Factor 88 (MyD88)
HZC042Mu 小鼠法尼酯X受体(FXR)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Farnesoid X Receptor (FXR)
HZL441Mu 小鼠DNA酶Ⅰ样蛋白3(DNASE1L3)ELISA试剂盒 ELISA Kit for Deoxyribonuclease I Like Protein 3 (DNASE1L3)
HZG374Mu 小鼠钙离子转运ATP酶A2(ATP2A2)ELISA试剂盒 ELISA Kit for ATPase, Ca++ Transporting, Cardiac Muscle, Slow Twitch 2 (ATP2A2)
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