人抗组织转谷氨酰胺酶抗体IgA(tTG-IgA)ELISA试剂盒中加样须注意如下问题:
1. 吸取样品时,加样枪吸头不应黏附多余的液体;加样时不可90度向孔中滴加液体,这样会导致液体残留在吸头上,加样不准确!
2. 不要将吸头伸入孔中,一方面若接触孔底可能压弯吸头,另一方面可能会将孔中的液体吹起来,加样不准确!
正确的加样方法应为45度,吸头贴着孔壁加入,应注意:
1. 角度太小,会使液体残留在孔壁上,导致加样不准确!
2. 吸头应当贴着管壁和液面的交界处!
在目前的以HRP作为标记酶的商品ELISA试剂盒中,如以TMB为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以OPD为底物,则试剂盒提供OPD片剂或粉剂,临用前配制。一般商品试剂盒显色反应条件为37℃或室温反应15~30分钟。从理论上说,37℃30分钟才可以使HRP的底物催化反应完全,尽管在最初的10分钟内,绝大部份催化反应即可完成。因此,为使弱阳性样本孔能有充分的显色,建议在37℃下反应25~30分钟后,终止反应比色测定。
此外,人抗组织转谷氨酰胺酶抗体IgA(tTG-IgA)ELISA试剂盒在加入底物开始显色反应前,最好是先检查一下底物溶液的有效性,即可将A和B两种液各加一滴于清洁的空板孔或eppendorf管中,观察是否有显色出现,如有,则说明底物已变质。以OPD为底物,配好后应为无色,否则就不能使用。以TMB为底物,整个显色反应过程无需避光,而以OPD为底物,则需避光进行。关于TMB和OPD的显色反应特点及注意点可参考前面有关章节内容。显色反应完成后,加入酸终止反应,振荡混匀后即可进行下面的比色测定或肉眼判断结果。
1.3 正态分布及标准差 ELISA试验中,检验同一样本达20次以上时,就会发现这组数据(指测定结果的吸光值)分布在均值两侧,大部分集中在均值附近。如果以测定值为横坐标,以出现的频率为纵坐标作图,就可绘出一个呈钟形的曲线图。如图5-1,钟顶处为均值,其他值以均值为中心对称分布,人抗组织转谷氨酰胺酶抗体IgA(tTG-IgA)ELISA试剂盒这就是正态分布。 正态曲线以下的面积称概率,常用样本的均数(X)和标准差(SD)来表示,其计算方法如下: 均值、标准差和概率的关系如下: X±1SD,概率0.68 X±2SD,概率0.95 X±3SD,概率0.99 换言之,当ELSIA检测同一样本达一定次数后所得的一组数据,其中靠近均值(X)的±1SD范围内的数据,占该组数据的68%,在X±2SD范围内分布的数据占总体的95%,在X±3SD范围内分布的数据占总体的99%。当我们要求检验结果在X±2SD范围内为合格时,将有95%的数据可能合格。
优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条
件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。
本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试
剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出
准确的结果。
人抗组织转谷氨酰胺酶抗体IgA(tTG-IgA)ELISA试剂盒相关产品系列表:
HZB226Hu人皮质醇结合球蛋白(CBG)ELISA试剂盒ELISA Kit for Corticosteroid Binding Globulin (CBG)
HZC345Hu人膜联蛋白A6(ANXA6)ELISA试剂盒ELISA Kit for Annexin A6 (ANXA6)
HZC795Hu人跨膜丝氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)ELISA试剂盒ELISA Kit for Transmembrane Protease, Serine 2 (TMPRSS2)
HZF997Hu人畸胎瘤衍生生长因子1(TDGF1)ELISA试剂盒ELISA Kit for Teratocarcinoma Derived Growth Factor 1 (TDGF1)
HZC156Hu人Ⅹ型胶原(COL10)ELISA试剂盒ELISA Kit for Collagen Type X (COL10)
HZC243Hu人拓扑异构酶Ⅰ(TOP1)ELISA试剂盒ELISA Kit for Topoisomerase I (TOP1)
HZF460Hu人叶酸受体1(FOLR1)ELISA试剂盒ELISA Kit for Folate Receptor 1, Adult (FOLR1)
HZB567Hu人细胞间粘附分子4(ICAM4)ELISA试剂盒ELISA Kit for Intercellular Adhesion Molecule 4 (ICAM4)
HZC719Hu人平足蛋白(PDPN)ELISA试剂盒ELISA Kit for Podoplanin (PDPN)
HZC285Hu人前梯度蛋白2(AGR2)ELISA试剂盒ELISA Kit for Anterior Gradient Protein 2 (AGR2)
HZC045Hu人存活素(Surv)ELISA试剂盒ELISA Kit for Survivin (Surv)
HZC170Hu人Persephin蛋白(PSPN)ELISA试剂盒ELISA Kit for Persephin (PSPN)
HZG888Hu人锚定蛋白重复域蛋白1(ANKRD1)ELISA试剂盒ELISA Kit for Ankyrin Repeat Domain Protein 1 (ANKRD1)
HZA171Hu人甲基多巴1α(MEP1α)ELISA试剂盒ELISA Kit for Meprin A Alpha (MEP1a)
HZA788Hu人细胞程序性死亡蛋白1配体1(PDCD1LG1)ELISA试剂盒ELISA Kit for Programmed Cell Death Protein 1 Ligand 1 (PDCD1LG1)
HZE931Hu人丝蛋白Bβ(FLNβ)ELISA试剂盒ELISA Kit for Filamin B Beta (FLNb)
HZE932Hu人丝蛋白Cγ(FLNC)ELISA试剂盒ELISA Kit for Filamin C Gamma (FLNC)
HZG515Hu人肥大细胞类糜蛋白酶1(CMA1)ELISA试剂盒ELISA Kit for Chymase 1, Mast Cell (CMA1)
HZD422Hu人肌球蛋白重链9(MYH9)ELISA试剂盒ELISA Kit for Myosin Heavy Chain 9, Non Muscle (MYH9)
HZD423Hu人肌球蛋白重链10(MYH10)ELISA试剂盒ELISA Kit for Myosin Heavy Chain 10, Non Muscle (MYH10)
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