人微量转铁蛋白(MTF)ELISA试剂盒中加样须注意如下问题:
1. 吸取样品时,加样枪吸头不应黏附多余的液体;加样时不可90度向孔中滴加液体,这样会导致液体残留在吸头上,加样不准确!
2. 不要将吸头伸入孔中,一方面若接触孔底可能压弯吸头,另一方面可能会将孔中的液体吹起来,加样不准确!
正确的加样方法应为45度,吸头贴着孔壁加入,应注意:
1. 角度太小,会使液体残留在孔壁上,导致加样不准确!
2. 吸头应当贴着管壁和液面的交界处!
在目前的以HRP作为标记酶的商品ELISA试剂盒中,如以TMB为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以OPD为底物,则试剂盒提供OPD片剂或粉剂,临用前配制。一般商品试剂盒显色反应条件为37℃或室温反应15~30分钟。从理论上说,37℃30分钟才可以使HRP的底物催化反应完全,尽管在最初的10分钟内,绝大部份催化反应即可完成。因此,为使弱阳性样本孔能有充分的显色,建议在37℃下反应25~30分钟后,终止反应比色测定。
此外,人微量转铁蛋白(MTF)ELISA试剂盒在加入底物开始显色反应前,最好是先检查一下底物溶液的有效性,即可将A和B两种液各加一滴于清洁的空板孔或eppendorf管中,观察是否有显色出现,如有,则说明底物已变质。以OPD为底物,配好后应为无色,否则就不能使用。以TMB为底物,整个显色反应过程无需避光,而以OPD为底物,则需避光进行。关于TMB和OPD的显色反应特点及注意点可参考前面有关章节内容。显色反应完成后,加入酸终止反应,振荡混匀后即可进行下面的比色测定或肉眼判断结果。
1.3 正态分布及标准差 ELISA试验中,检验同一样本达20次以上时,就会发现这组数据(指测定结果的吸光值)分布在均值两侧,大部分集中在均值附近。如果以测定值为横坐标,以出现的频率为纵坐标作图,就可绘出一个呈钟形的曲线图。如图5-1,钟顶处为均值,其他值以均值为中心对称分布,这就是正态分布。 正态曲线以下的面积称概率,常用样本的均数(X)和标准差(SD)来表示,其计算方法如下: 均值、标准差和概率的关系如下: X±1SD,概率0.68 X±2SD,概率0.95 X±3SD,人微量转铁蛋白(MTF)ELISA试剂盒概率0.99 换言之,当ELSIA检测同一样本达一定次数后所得的一组数据,其中靠近均值(X)的±1SD范围内的数据,占该组数据的68%,在X±2SD范围内分布的数据占总体的95%,在X±3SD范围内分布的数据占总体的99%。当我们要求检验结果在X±2SD范围内为合格时,将有95%的数据可能合格。
优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条
件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。
本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试
剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出
准确的结果。
人微量转铁蛋白(MTF)ELISA试剂盒相关产品系列表:
hz-E13269 兔子纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA试剂盒 rabbit plasminogen activator inhibitor 1,PAI-1 ELISAkit
hz-E13270 兔子细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA试剂盒 rabbit intercellular adhesion molecule 3,ICAM-3 ELISAkit
hz-E13271 兔子葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽(GIP)ELISA试剂盒 Rabbit Glucose dependent insulin releasing polypeptide,GIP ELISAkit
hz-E13272 兔子细胞间粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA试剂盒 rabbit intercellular adhesion molecule 2,ICAM-2 ELISAkit
hz-E13273 兔子细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA试剂盒 rabbit intercellular adhesion molecule 1,ICAM-1/CD54 ELISAkit
hz-E13274 兔子透明质酸(HA)ELISA试剂盒 rabbit Hyaluronic acid,HA ELISAkit
hz-E13275 兔子瘦素(LEP)ELISA试剂盒 rabbit Leptin,LEP ELISAkit
hz-E13276 兔子神经营养因子4(NT-4)ELISA试剂盒 rabbit neurotrophin 4,NT-4 ELISAkit
hz-E13277 兔子神经营养因子3(NT-3)ELISA试剂盒 rabbit neurotrophin 3,NT-3 ELISAkit
hz-E13278 兔子神经特异性烯醇化酶(NSE)ELISA试剂盒 rabbit Neuron-specific enolase,NSE ELISAkit
hz-E13279 兔子神经生长因子(NGF)ELISA试剂盒 rabbit Nerve growth factor,NGF ELISAkit
hz-E13280 兔子脱氢表雄酮硫酸酯(DHEA-S)ELISA试剂盒 rabbit Dehydroepiandrosterone sulfate,DHEA-S ELISAkit
hz-E13281 兔子髓磷脂碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒 Rabbit myelin basic protein,MBP ELISAkit
hz-E13282 兔子前列腺素E2(PGE2)ELISA试剂盒 rabbit Prostaglandin E2,PG-E2 ELISAkit
hz-E13283 兔子前列腺素E1(PGE1)ELISA试剂盒 rabbit Prostaglandin E1,PGE1 ELISAkit
hz-E13284 兔子皮质酮/肾上腺酮(CORT)ELISA试剂盒 rabbit Corticosterone,CORT ELISAkit
hz-E13285 兔子皮质醇(Cortisol)ELISA试剂盒 Rabbit Cortisol ELISAkit
hz-E13286 兔子脑钠素/脑钠尿肽(BNP)ELISA试剂盒 rabbit brain natriuretic peptide,BNP ELISAkit
hz-E13287 兔子内皮抑素(ES)ELISA试剂盒 rabbit Endostatin,ES ELISAkit
hz-E13288 兔子内皮素1(ET-1)ELISA试剂盒 rabbit Endothelin 1,ET-1 ELISAkit
hz-E13289 兔子免疫球蛋白G(IgG)ELISA试剂盒 rabbit Immunoglobulin G,IgG ELISAkit
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