人嗜铬蛋白A(CgA)ELISA试剂盒中加样须注意如下问题:
1. 吸取样品时,加样枪吸头不应黏附多余的液体;加样时不可90度向孔中滴加液体,这样会导致液体残留在吸头上,加样不准确!
2. 不要将吸头伸入孔中,一方面若接触孔底可能压弯吸头,另一方面可能会将孔中的液体吹起来,加样不准确!
正确的加样方法应为45度,吸头贴着孔壁加入,应注意:
1. 角度太小,会使液体残留在孔壁上,导致加样不准确!
2. 吸头应当贴着管壁和液面的交界处!
在目前的以HRP作为标记酶的商品ELISA试剂盒中,如以TMB为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以OPD为底物,则试剂盒提供OPD片剂或粉剂,临用前配制。一般商品试剂盒显色反应条件为37℃或室温反应15~30分钟。从理论上说,37℃30分钟才可以使HRP的底物催化反应完全,尽管在最初的10分钟内,绝大部份催化反应即可完成。因此,为使弱阳性样本孔能有充分的显色,建议在37℃下反应25~30分钟后,终止反应比色测定。
此外,人嗜铬蛋白A(CgA)ELISA试剂盒在加入底物开始显色反应前,最好是先检查一下底物溶液的有效性,即可将A和B两种液各加一滴于清洁的空板孔或eppendorf管中,观察是否有显色出现,如有,则说明底物已变质。以OPD为底物,配好后应为无色,否则就不能使用。以TMB为底物,整个显色反应过程无需避光,而以OPD为底物,则需避光进行。关于TMB和OPD的显色反应特点及注意点可参考前面有关章节内容。显色反应完成后,加入酸终止反应,振荡混匀后即可进行下面的比色测定或肉眼判断结果。
1.3 正态分布及标准差 ELISA试验中,检验同一样本达20次以上时,就会发现这组数据(指测定结果的吸光值)分布在均值两侧,大部分集中在均值附近。如果以测定值为横坐标,以出现的频率为纵坐标作图,就可绘出一个呈钟形的曲线图。如图5-1,钟顶处为均值,其他值以均值为中心对称分布,这就是正态分布。 正态曲线以下的面积称概率,常用样本的均数(X)和标准差(SD)来表示,其计算方法如下: 均值、标准差和概率的关系如下: X±1SD,概率0.68 X±2SD,概率0.95 X±3SD,人嗜铬蛋白A(CgA)ELISA试剂盒概率0.99 换言之,当ELSIA检测同一样本达一定次数后所得的一组数据,其中靠近均值(X)的±1SD范围内的数据,占该组数据的68%,在X±2SD范围内分布的数据占总体的95%,在X±3SD范围内分布的数据占总体的99%。当我们要求检验结果在X±2SD范围内为合格时,将有95%的数据可能合格。
优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条
件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。
本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试
剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出
准确的结果。
人嗜铬蛋白A(CgA)ELISA试剂盒相关产品系列表:
hz-E12566 大鼠胆囊收缩素/肠促胰酶肽(CCK)ELISA试剂盒 Rat Cholecystokinin,CCK ELISAkit
hz-E12567 大鼠脑肠肽(BGP/Gehrelin)ELISA试剂盒 Rat brain-gut peptides,BGP/Gehrelin ELISAkit
hz-E12568 大鼠6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA试剂盒 Rat 6-keto-prostaglandin,6-K-PG ELISAkit
hz-E12569 大鼠载脂蛋白A1(apo-A1)ELISA试剂盒 Rat apoprotein A1,apo-A1 ELISAkit
hz-E12570 大鼠载脂蛋白B100(apo-B100)ELISA试剂盒 Rat apoprotein B100,apo-B100 ELISAkit
hz-E12571 大鼠25羟基维生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA试剂盒 Rat 25-Dihydroxy vitamin D3,HVD3 ELISAkit
hz-E12572 大鼠Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)ELISA试剂盒 Rat N-terminal procollagen Ⅲ propeptide,PⅢNP ELISAkit
hz-E12573 大鼠Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)ELISA试剂盒 Rat Collagen Type Ⅱ,Col Ⅱ ELISAkit
hz-E12574 大鼠维生素C(VC)ELISA试剂盒 Rat Vitamin C,VC ELISAkit
hz-E12575 大鼠维生素B6(VB6)ELISA试剂盒 Rat Vitamin B6,VB6 ELISAkit
hz-E12576 大鼠Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)ELISA试剂盒 Rat Collagen Type Ⅰ,Col Ⅰ ELISAkit
hz-E12577 大鼠Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)ELISA试剂盒 Rat Carboxyterminal propeptide of type Ⅰ procollagen,PⅠCP ELISAkit
hz-E12578 大鼠可溶性P选择素(sP-selectin)ELISA试剂盒 Rat soluble P-selectin,sP-selectin ELISAkit
hz-E12579 大鼠S100蛋白(S-100)ELISA试剂盒 Rat Soluble protein-100,S-100 ELISAkit
hz-E12580 大鼠S100B蛋白(S-100B)ELISA试剂盒 Rat Soluble protein-100B,S-100B ELISAkit
hz-E12581 大鼠白介素1(IL-1)ELISA试剂盒 Rat Interleukin 1,IL-1 ELISAkit
hz-E12582 大鼠白介素1β (IL-1β)ELISA试剂盒 Rat Interleukin 1β,IL-1β ELISAkit
hz-E12583 大鼠肌红蛋白(MYO/MB)ELISA试剂盒 Rat Myoglobin,MYO/MB ELISAkit
hz-E12584 大鼠血栓素B2(TXB2)ELISA试剂盒 Rat Thromboxane B2,TXB2 ELISAkit
hz-E12585 大鼠乙酰胆碱(Ach)ELISA试剂盒 Rat acetylcholine,ACH ELISAkit
hz-E12586 大鼠促甲状腺素释放激素(TRH)ELISA试剂盒 Rat thyrotropin-releasing hormone,TRH ELISAkit
hz-E12587 大鼠抗甲状腺球蛋白抗体(ATGA/TGAB)ELISA试剂盒 Rat Anti-thyroid-globulin antibody,ATGA/TGAB ELISAkit
hz-E12588 大鼠促肾上皮质激素释放激素(CRH)ELISA试剂盒 Rat corticotropin releasing hormone,CRH ELISAkit
hz-E12589 大鼠促性腺激素释放激素(GnRH)ELISA试剂盒 Rat gonadotropin-releasing hormone,GnRH ELISAkit
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