人γ干扰素诱导单核细胞因子(MIGF/CXCL9)ELISA试剂盒中加样须注意如下问题:
1. 吸取样品时,加样枪吸头不应黏附多余的液体;加样时不可90度向孔中滴加液体,这样会导致液体残留在吸头上,加样不准确!
2. 不要将吸头伸入孔中,一方面若接触孔底可能压弯吸头,另一方面可能会将孔中的液体吹起来,加样不准确!
正确的加样方法应为45度,吸头贴着孔壁加入,应注意:
1. 角度太小,会使液体残留在孔壁上,导致加样不准确!
2. 吸头应当贴着管壁和液面的交界处!
在目前的以HRP作为标记酶的商品ELISA试剂盒中,如以TMB为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以OPD为底物,则试剂盒提供OPD片剂或粉剂,临用前配制。一般商品试剂盒显色反应条件为37℃或室温反应15~30分钟。从理论上说,37℃30分钟才可以使HRP的底物催化反应完全,尽管在最初的10分钟内,绝大部份催化反应即可完成。因此,为使弱阳性样本孔能有充分的显色,建议在37℃下反应25~30分钟后,终止反应比色测定。
此外,人γ干扰素诱导单核细胞因子(MIGF/CXCL9)ELISA试剂盒在加入底物开始显色反应前,最好是先检查一下底物溶液的有效性,即可将A和B两种液各加一滴于清洁的空板孔或eppendorf管中,观察是否有显色出现,如有,则说明底物已变质。以OPD为底物,配好后应为无色,否则就不能使用。以TMB为底物,整个显色反应过程无需避光,而以OPD为底物,则需避光进行。关于TMB和OPD的显色反应特点及注意点可参考前面有关章节内容。显色反应完成后,加入酸终止反应,振荡混匀后即可进行下面的比色测定或肉眼判断结果。
1.3 正态分布及标准差 ELISA试验中,检验同一样本达20次以上时,就会发现这组数据(指测定结果的吸光值)分布在均值两侧,大部分集中在均值附近。如果以测定值为横坐标,以出现的频率为纵坐标作图,就可绘出一个呈钟形的曲线图。如图5-1,钟顶处为均值,其他值以均值为中心对称分布,这就是正态分布。 正态曲线以下的面积称概率,常用样本的均数(X)和标准差(SD)来表示,其计算方法如下: 均值、标准差和概率的关系如下: X±1SD,概率0.68 X±2SD,概率0.95 X±3SD,概率0.99 换言之,当ELSIA检测同一样本达一定次数后所得的一组数据,其中靠近均值(X)的±1SD范围内的数据,占该组数据的68%,在X±2SD范围内分布的数据占总体的95%,人γ干扰素诱导单核细胞因子(MIGF/CXCL9)ELISA试剂盒在X±3SD范围内分布的数据占总体的99%。当我们要求检验结果在X±2SD范围内为合格时,将有95%的数据可能合格。
优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条
件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。
本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试
剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出
准确的结果。
人γ干扰素诱导单核细胞因子(MIGF/CXCL9)ELISA试剂盒相关产品系列表:
hz-E11824 小鼠层连蛋白/板层素(LN)ELISA试剂盒 Mouse Laminin,LN ELISAkit
hz-E11825 小鼠巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA试剂盒 Mouse Macrophage Colony-Stimulating Factor,M-CSF ELISAkit
hz-E11826 小鼠巨噬细胞来源的趋化因子(MDC/CCL22)ELISA试剂盒 Mouse Macrophage-Derived Chemokine,MDC ELISAkit
hz-E11827 小鼠正常T细胞表达和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA试剂盒 Mouse regulated on activation in normal T-cell expressed and secreted,RANTES ELISAkit
hz-E11828 小鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA试剂盒 Mouse Macrophage Inflammatory Protein 2,MIP-2 ELISAkit
hz-E11829 小鼠催产素(OT)ELISA试剂盒 Mouse oxytocin,OT ELISAkit
hz-E11830 7 Mouse macrophage inflammatory protein 3β,MIP-3β ELISAkit
hz-E11831 小鼠Ⅰ型胶原N末端肽(NTX)ELISA试剂盒 Mouse cross linked N-telopeptide of type Ⅰ collagen,NTX ELISAkit
hz-E11832 小鼠5核苷酸酶(5-NT)ELISA试剂盒 Mouse 5-Nucleotidase,5-NT ELISAkit
hz-E11833 小鼠神经生长因子(NGF)ELISA试剂盒 Mouse Nerve growth factor,NGF ELISAkit
hz-E11834 小鼠神经营养因子3(NT-3)ELISA试剂盒 Mouse Neurotrophin 3,NT-3 ELISAkit
hz-E11835 小鼠神经营养因子4(NT-4)ELISA试剂盒 Mouse Neurotrophin 4,NT-4 ELISAkit
hz-E11836 小鼠骨保护素(OPG)ELISA试剂盒 Mouse Osteoprotegerin,OPG ELISAkit
hz-E11837 小鼠B因子(BF)ELISA试剂盒 Mouse factor B,BF ELISAkit
hz-E11838 小鼠抑瘤素M(OSM)ELISA试剂盒 Mouse Oncostatin-M,OSM ELISAkit
hz-E11839 小鼠血小板衍生生长因子可溶性受体α(PDGFsR-α)ELISA试剂盒 Mouse Platelet-Derived Growth Factor Soluble Receptor α,PDGFsR-α ELISAkit
hz-E11840 小鼠血小板衍生生长因子AB(PDGF-AB)ELISA试剂盒 Mouse Platelet-Derived Growth Factor AB,PDGF-AB ELISAkit
hz-E11841 小鼠P选择素(P-Selectin/CD62P)ELISA试剂盒 Mouse P-Selectin ELISAkit
hz-E11842 小鼠L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA试剂盒 Mouse L-Phenylalanine ammonla-lyase,PAL ELISAkit
hz-E11843 小鼠可溶性CD30配体(sCD30L)ELISA试剂盒 Mouse Soluble Cluster of differentiation 30 ligand,sCD30L ELISAkit
hz-E11844 小鼠干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)ELISA试剂盒 Mouse Stem cell factor/mast cell growth factor,SCF/MGF ELISAkit
hz-E11845 小鼠基质细胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA试剂盒 Mouse Stromal cell derived factor 1β,SDF-1β ELISAkit
hz-E11846 小鼠转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒 Mouse Transforming Growth factor β1,TGF-β1 ELISAkit
hz-E11847 小鼠肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA试剂盒 Mouse Tumor necrosis factor soluble receptor Ⅰ,TNFsR-Ⅰ ELISAkit
hz-E11848 小鼠肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA试剂盒 Mouse Tumor necrosis factor soluble receptor Ⅱ,TNFsR-Ⅱ ELISAkit
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