人神经保护因子(CVNPF)ELISA试剂盒中加样须注意如下问题:
1. 吸取样品时,加样枪吸头不应黏附多余的液体;加样时不可90度向孔中滴加液体,这样会导致液体残留在吸头上,加样不准确!
2. 不要将吸头伸入孔中,一方面若接触孔底可能压弯吸头,另一方面可能会将孔中的液体吹起来,加样不准确!
正确的加样方法应为45度,吸头贴着孔壁加入,应注意:
1. 角度太小,会使液体残留在孔壁上,导致加样不准确!
2. 吸头应当贴着管壁和液面的交界处!
在目前的以HRP作为标记酶的商品ELISA试剂盒中,如以TMB为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以OPD为底物,则试剂盒提供OPD片剂或粉剂,临用前配制。一般商品试剂盒显色反应条件为37℃或室温反应15~30分钟。从理论上说,37℃30分钟才可以使HRP的底物催化反应完全,尽管在最初的10分钟内,绝大部份催化反应即可完成。因此,为使弱阳性样本孔能有充分的显色,建议在37℃下反应25~30分钟后,终止反应比色测定。
此外,人神经保护因子(CVNPF)ELISA试剂盒在加入底物开始显色反应前,最好是先检查一下底物溶液的有效性,即可将A和B两种液各加一滴于清洁的空板孔或eppendorf管中,观察是否有显色出现,如有,则说明底物已变质。以OPD为底物,配好后应为无色,否则就不能使用。以TMB为底物,整个显色反应过程无需避光,而以OPD为底物,则需避光进行。关于TMB和OPD的显色反应特点及注意点可参考前面有关章节内容。显色反应完成后,加入酸终止反应,振荡混匀后即可进行下面的比色测定或肉眼判断结果。
1.3 正态分布及标准差 ELISA试验中,检验同一样本达20次以上时,就会发现这组数据(指测定结果的吸光值)分布在均值两侧,大部分集中在均值附近。如果以测定值为横坐标,以出现的频率为纵坐标作图,就可绘出一个呈钟形的曲线图。如图5-1,钟顶处为均值,其他值以均值为中心对称分布,这就是正态分布。 正态曲线以下的面积称概率,常用样本的均数(X)和标准差(SD)来表示,其计算方法如下: 均值、标准差和概率的关系如下: X±1SD,概率0.68 X±2SD,概率0.95 X±3SD,概率0.99 换言之,当ELSIA检测同一样本达一定次数后所得的一组数据,其中靠近均值(X)的±1SD范围内的数据,占该组数据的68%,在X±2SD范围内分布的数据占总体的95%,人神经保护因子(CVNPF)ELISA试剂盒在X±3SD范围内分布的数据占总体的99%。当我们要求检验结果在X±2SD范围内为合格时,将有95%的数据可能合格。
优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条
件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。
本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试
剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出
准确的结果。
人神经保护因子(CVNPF)ELISA试剂盒相关产品系列表:
hz-E11694 小鼠解整合素样金属蛋白酶9(ADAM9)ELISA试剂盒 Mouse A Disintegrin And Metalloprotease 9,ADAM9 ELISAkit
hz-E11695 小鼠氧化型谷胱甘肽(GSGS)ELISA试剂盒 Mouse oxidizided glutathione,GSGS ELISAkit
hz-E11696 小鼠还原型谷胱甘肽(GSH)ELISA试剂盒 Mouse reduced glutathione,GSH ELISAkit
hz-E11697 小鼠肌钙蛋白T(Tn-T)ELISA试剂盒 Mouse Troponin T,Tn-T ELISAkit
hz-E11698 小鼠c-fos ELISA试剂盒 Mouse c-fos ELISAkit
hz-E11699 小鼠c-jun ELISA试剂盒 Mouse c-jun ELISAkit
hz-E11700 小鼠抗透明带抗体(aZP)ELISA试剂盒 Mouse anti-zona pellucida antibody,aZP ELISAkit
hz-E11701 小鼠粘蛋白/粘液素7(MUC7)ELISA试剂盒 Mouse Mucin-7,MUC7 ELISAkit
hz-E11702 小鼠嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)ELISA试剂盒 Mouse eosinophil cationic protein,ECP ELISAkit
hz-E11703 小鼠Qa淋巴细胞抗原2(Qa-2)ELISA试剂盒 Mouse Qa lymphocyte antigen 2 region,Qa-2 ELISAkit
hz-E11704 小鼠D-乳酸脱氢酶(D-LDH)ELISA试剂盒 Mouse D-Lactate Dehydrogenase,D-LDH ELISAkit
hz-E11705 小鼠孕酮受体(PROGR)ELISA试剂盒 Mouse Lysozyme,LZM ELISAkit
hz-E11706 小鼠β连环蛋白/联蛋白(β-Cat)ELISA试剂盒 Mouse β-catenin,β-cat ELISAkit
hz-E11707 小鼠骨退化特异标志物(CTX-2)ELISA试剂盒 Mouse CTX-2 ELISAkit
hz-E11708 小鼠垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)ELISA试剂盒 Mouse pituitary adenylate cyclase activating polypeptide,PACAP ELISAkit
hz-E11709 小鼠血管紧张素转化酶(ACE)ELISA试剂盒 Mouse Angiotensin converting enzyme,ACE ELISAkit
hz-E11710 小鼠血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA试剂盒 Mouse angiotension Ⅱ,ANG-Ⅱ ELISAkit
hz-E11711 小鼠角化细胞内分泌因子(KAF)/双调蛋白(AR)ELISA试剂盒 Mouse keratinocyte autocrine factor/Amphiregulin,KAF/AR ELISAkit
hz-E11712 小鼠活化素A(ACV-A)ELISA试剂盒 Mouse Activin A,ACV-A ELISAkit
hz-E11713 小鼠脑源性神经营养因子(BDNF)ELISA试剂盒 Mouse Brain derived neurotrophic facor,BDNF ELISAkit
hz-E11714 小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA试剂盒 Mouse Bone morphogenetic protein 2,BMP-2 ELISAkit
hz-E11715 小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA试剂盒 Mouse Bone morphogenetic protein 4,BMP-4 ELISAkit
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