人可溶性粘附分子(Sam)ELISA试剂盒中加样须注意如下问题:
1. 吸取样品时,加样枪吸头不应黏附多余的液体;加样时不可90度向孔中滴加液体,这样会导致液体残留在吸头上,加样不准确!
2. 不要将吸头伸入孔中,一方面若接触孔底可能压弯吸头,另一方面可能会将孔中的液体吹起来,加样不准确!
正确的加样方法应为45度,吸头贴着孔壁加入,应注意:
1. 角度太小,会使液体残留在孔壁上,导致加样不准确!
2. 吸头应当贴着管壁和液面的交界处!
在目前的以HRP作为标记酶的商品ELISA试剂盒中,如以TMB为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以OPD为底物,则试剂盒提供OPD片剂或粉剂,临用前配制。一般商品试剂盒显色反应条件为37℃或室温反应15~30分钟。从理论上说,37℃30分钟才可以使HRP的底物催化反应完全,尽管在最初的10分钟内,绝大部份催化反应即可完成。因此,为使弱阳性样本孔能有充分的显色,建议在37℃下反应25~30分钟后,终止反应比色测定。
此外,人可溶性粘附分子(Sam)ELISA试剂盒在加入底物开始显色反应前,最好是先检查一下底物溶液的有效性,即可将A和B两种液各加一滴于清洁的空板孔或eppendorf管中,观察是否有显色出现,如有,则说明底物已变质。以OPD为底物,配好后应为无色,否则就不能使用。以TMB为底物,整个显色反应过程无需避光,而以OPD为底物,则需避光进行。关于TMB和OPD的显色反应特点及注意点可参考前面有关章节内容。显色反应完成后,加入酸终止反应,振荡混匀后即可进行下面的比色测定或肉眼判断结果。
1.3 正态分布及标准差 ELISA试验中,检验同一样本达20次以上时,就会发现这组数据(指测定结果的吸光值)分布在均值两侧,大部分集中在均值附近。如果以测定值为横坐标,以出现的频率为纵坐标作图,就可绘出一个呈钟形的曲线图。如图5-1,钟顶处为均值,其他值以均值为中心对称分布,这就是正态分布。 正态曲线以下的面积称概率,常用样本的均数(X)和标准差(SD)来表示,其计算方法如下: 均值、标准差和概率的关系如下: X±1SD,概率0.68 X±2SD,概率0.95 X±3SD,概率0.99 换言之,当ELSIA检测同一样本达一定次数后所得的一组数据,其中靠近均值(X)的±1SD范围内的数据,占该组数据的68%,在X±2SD范围内分布的数据占总体的95%,人可溶性粘附分子(Sam)ELISA试剂盒在X±3SD范围内分布的数据占总体的99%。当我们要求检验结果在X±2SD范围内为合格时,将有95%的数据可能合格。
优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条
件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。
本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试
剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出
准确的结果。
人可溶性粘附分子(Sam)ELISA试剂盒相关产品系列表:
hz-E11321 人抗EB病毒抗体(EBV)ELISA试剂盒 Human anti-Epstein-Barr virus antibody,EBV ELISAkit
hz-E11322 人孕酮受体(PGR)ELISA试剂盒 Human progesterone receptor,PGR ELISAkit
hz-E11323 人新生儿促甲状腺素(N-TSH)ELISA试剂盒 Human Neonatal Thyroid Stimulating Hormone,N-TSH ELISAkit
hz-E11324 人妊娠特异性β1糖蛋白(SP1/PSβ1-G)ELISA试剂盒 Human Pregnancy Specificβ1Glycoprotein,SP1/PSβ1-G ELISAkit
hz-E11325 人胎盘泌乳素(PL)ELISA试剂盒 Human placetal lactogen,PL ELISAkit
hz-E11326 人雄激素结合蛋白(ABP)ELISA试剂盒 Human Androgen Binding Protein,ABP ELISAkit
hz-E11327 人抗滋养膜细胞抗体(ATA)ELISA试剂盒 Human anti-trophoblast antibody,ATA ELISAkit
hz-E11328 人抗透明带抗体(aZP)ELISA试剂盒 Human anti-zona pellucida antibody,aZP ELISAkit
hz-E11329 人抗卵巢抗体(AOAb)ELISA试剂盒 Human Anti-Ovary Antibody,AOAb ELISAkit
hz-E11330 人抗巨细胞病毒抗体IgG(anti-CMV IgG)ELISA试剂盒 Human anti-cytomegalovirus IgG antibody,anti-CMV IgG ELISAkit
hz-E11331 人碱性胎儿蛋白(BFP)ELISA试剂盒 Human basic fetoprotein,BFP ELISAkit
hz-E11332 人抗风疹病毒IgM抗体(anti-RV IgM)ELISA试剂盒 Human anti-rubella virus IgM antibody,anti-RV IgM ELISAkit
hz-E11333 人催产素(OT)ELISA试剂盒 Human oxytocin,OT ELISAkit
hz-E11334 人妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)ELISA试剂盒 Human pregnancy associated plasma protein A,PAPP-A ELISAkit
hz-E11335 人抗子宫内膜抗体(EMAb)ELISA试剂盒 Human Endometrium Antibody,EMAb ELISAkit
hz-E11336 人抗精子抗体(AsAb)ELISA试剂盒 Human anti-sperm antibody,AsAb ELISAkit
hz-E11337 人妊娠疱疹抗体(HG)ELISA试剂盒 Human Herpes Gestation,HG ELISAkit
hz-E11338 人胎盘生长因子(PLGF)ELISA试剂盒 Human placenta growth factor,PLGF ELISAkit
hz-E11339 小鼠FMS样酪氨酸激酶3配体(Flt3L)ELISA试剂盒 Mouse FMS-like tyrosine kinase 3 ligand,Flt-3L ELISAkit
hz-E11340 小鼠糖蛋白130(gp130)ELISA试剂盒 Mouse glucoprotein 130,gp130 ELISAkit
hz-E11341 小鼠γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒 Mouse Interferon γ ,IFN-γ ELISAkitKit
hz-E11342 小鼠胰岛素样生长因子2(IGF-2)ELISA试剂盒 Mouse Insulin-like growth factor 2,IGF-2 ELISAkit
hz-E11343 小鼠白介素13(IL-13)ELISA试剂盒 Mouse Interleukin 13,IL-13 ELISAkit
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