小鼠尼克酰胺-N-甲基转移酶(NNMT)检测试剂盒中加样须注意如下问题:
1. 吸取样品时,加样枪吸头不应黏附多余的液体;加样时不可90度向孔中滴加液体,这样会导致液体残留在吸头上,加样不准确!
2. 不要将吸头伸入孔中,一方面若接触孔底可能压弯吸头,另一方面可能会将孔中的液体吹起来,加样不准确!
正确的加样方法应为45度,吸头贴着孔壁加入,应注意:
1. 角度太小,会使液体残留在孔壁上,导致加样不准确!
2. 吸头应当贴着管壁和液面的交界处!
在目前的以HRP作为标记酶的商品ELISA试剂盒中,如以TMB为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以OPD为底物,则试剂盒提供OPD片剂或粉剂,临用前配制。一般商品试剂盒显色反应条件为37℃或室温反应15~30分钟。从理论上说,37℃30分钟才可以使HRP的底物催化反应完全,尽管在最初的10分钟内,绝大部份催化反应即可完成。因此,为使弱阳性样本孔能有充分的显色,建议在37℃下反应25~30分钟后,终止反应比色测定。
此外,小鼠尼克酰胺-N-甲基转移酶(NNMT)检测试剂盒在加入底物开始显色反应前,最好是先检查一下底物溶液的有效性,即可将A和B两种液各加一滴于清洁的空板孔或eppendorf管中,观察是否有显色出现,如有,则说明底物已变质。以OPD为底物,配好后应为无色,否则就不能使用。以TMB为底物,整个显色反应过程无需避光,而以OPD为底物,则需避光进行。关于TMB和OPD的显色反应特点及注意点可参考前面有关章节内容。显色反应完成后,加入酸终止反应,振荡混匀后即可进行下面的比色测定或肉眼判断结果。
1.3 正态分布及标准差 ELISA试验中,检验同一样本达20次以上时,就会发现这组数据(指测定结果的吸光值)分布在均值两侧,大部分集中在均值附近。如果以测定值为横坐标,以出现的频率为纵坐标作图,就可绘出一个呈钟形的曲线图。如图5-1,钟顶处为均值,其他值以均值为中心对称分布,这就是正态分布。 正态曲线以下的面积称概率,常用样本的均数(X)和标准差(SD)来表示,其计算方法如下: 均值、标准差和概率的关系如下: X±1SD,概率0.68 X±2SD,概率0.95 X±3SD,概率0.99 换言之,当ELSIA检测同一样本达一定次数后所得的一组数据,其中靠近均值(X)的±1SD范围内的数据,占该组数据的68%,在X±2SD范围内分布的数据占总体的95%,在X±3SD范围内分布的数据占总体的99%。当我们要求检验结果在X±2SD范围内为合格时,将有95%的数据可能合格。小鼠尼克酰胺-N-甲基转移酶(NNMT)检测试剂盒
优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条
件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。
本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试
剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出
准确的结果。
小鼠尼克酰胺-N-甲基转移酶(NNMT)检测试剂盒相关产品系列表:
Human Macrophage Migration Inhibitory Factor,MIF ELISAkit 人巨噬细胞移动抑制因子(MIF)检测试剂盒96t/48t
Human Tissue factor pathway inhibitor,TFPI ELISAkit 人组织因子途径抑制物(TFPI)检测试剂盒96t/48t
Human interferon-inducible protein 10,IP-10 ELISAkit 人干扰素诱导蛋白10(IP-10/CXCL10)检测试剂盒96t/48t
Human Interleukin 1,IL-1 ELISAkit 人白介素1(IL-1)检测试剂盒96t/48t
Human Interleukin 17,IL-17 ELISAkit 人白介素17(IL-17)检测试剂盒96t/48t
Human Interleukin 1β,IL-1β ELISAkit 人白介素1β (IL-1β)检测试剂盒96t/48t
Human Epidermal growth factor,EGF ELISAkit 人表皮生长因子(EGF)检测试剂盒96t/48t
Human basic fibroblast growth factor,bFGF ELISAkit 人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)检测试剂盒96t/48t
Human macrophage inflammatory protein 5,MIP-5 ELISAkit 人巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)检测试剂盒96t/48t
Human soluble E-selectin,sE-selectin ELISAkit 人可溶性E选择素(sE-selectin)检测试剂盒96t/48t
Human Soluble Intercellular Adhesion Molecule-1,sICAM-1 人可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)检测试剂盒96t/48t
Human intercellular adhesion molecule 2,ICAM-2 ELISAkit 人细胞间粘附分子2(ICAM-2/CD102)检测试剂盒96t/48t
Human intercellular adhesion molecule 3,ICAM-3 ELISAkit 人细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)检测试剂盒96t/48t
Human connective tissue growth factor,CTGF ELISAkit 人结缔组织生长因子(CTGF)检测试剂盒96t/48t
Human Interleukin 18,IL-18 ELISAkit 人白介素18(IL-18)检测试剂盒96t/48t
Human mucosae associated epithelia chemokine,MEC ELISAkit 人粘膜相关上皮趋化因子(MEC/CCL28)检测试剂盒96t/48t
Human B cell activation factorr from the tumor necrosis factor family 人B细胞活化因子受体(BAFF-R)检测试剂盒96t/48t
Human Vascuoar endothelial cell growth factor 人血管内皮细胞生长因子受体3(VEGFR-3/Flt-4)检测试剂盒96t/48t
Human Vascuoar endothelial cell growth factor 人血管内皮细胞生长因子受体1(VEGFR-1/Flt1)检测试剂盒96t/48t
Human Vascular Endothelial cell Growth Factor D,VEGF-D 人血管内皮细胞生长因子D(VEGF-D)检测试剂盒96t/48t
Human Vascular Endothelial cell Growth Factor C,VEGF-C 人血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)检测试剂盒96t/48t
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