在小鼠钠/钾离子转运ATP酶β3肽(ATP1β3)检测试剂盒中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18~24小时。蛋白质包被的最适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,小鼠钠/钾离子转运ATP酶β3肽(ATP1β3)检测试剂盒观察阳性标本的OD值。选择OD值最大而蛋白量最少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
(3) 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。
实验原理
小鼠钠/钾离子转运ATP酶β3肽(ATP1β3)检测试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中
TLR水平。用纯化的抗体包被微孔
板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入
TLR抗原、生物素化的抗人
TLR抗体、HRP
标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下
转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的TLR呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。试剂盒组成及试剂配制
小鼠钠/钾离子转运ATP酶β3肽(ATP1β3)检测试剂盒相关如下:
ELISA Kit for G Protein Coupled Receptor 120 (GPR120) 小鼠G蛋白偶联受体120(GPR120)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for E1A Binding Protein P300 (EP300) 小鼠E1A结合蛋白P300(EP300)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Polyamine Oxidase (PAOX) 小鼠多胺氧化酶(PAOX)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for V-Erb B2 Erythroblastic Leukemia Viral 小鼠V-Erb B2红白血病病毒癌基因同源物3(ErbB3)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for CCAAT/Enhancer Binding Protein Beta (CEBPb) 小鼠CCAAT增强子结合蛋白β(CEBPβ)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Quiescin Q6 Sulfhydryl Oxidase 1 (QSOX1) 小鼠静止素Q6硫基氧化酶1(QSOX1)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor Receptor 3 (FGFR3) 小鼠成纤维细胞生长因子受体3(FGFR3)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Chemokine C-C-Motif Ligand 1 (CCL1) 小鼠趋化因子C-C-基元配体1(CCL1)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Folate Receptor 1, Adult (FOLR1) 小鼠叶酸受体1(FOLR1)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Solute Carrier Family 30, Member 10 (SLC30A10) 小鼠溶质载体家族30成员10(SLC30A10)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Dickkopf Related Protein 1 (DKK1) 小鼠Dickkopf相关蛋白1(DKK1)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Chemerin (CHEM) 小鼠趋化素(CHEM)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Monocyte Chemotactic Protein 5 (MCP5) 小鼠单核细胞趋化蛋白5(MCP5)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Milk Fat Globule EGF Factor 8 (MFGE8) 小鼠乳脂球表皮生长因子8(MFGE8)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Receptor 小鼠肿瘤坏死因子受体超家族成员5(TNFRSF5)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Cadherin, Placental (CDHP) 小鼠胎盘钙黏蛋白(CDHP)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Glutamate Cysteine Ligase, Modifier Subunit 小鼠谷氨酸半胱氨酸连接酶(GCLM)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Inhibitory Subunit Of NF Kappa B Alpha (IkBa) 小鼠核因子κB抑制因子α(IκBα)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Peroxiredoxin 1 (PRDX1) 小鼠过氧化还原酶1(PRDX1)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Platelet Derived Growth Factor Subunit B 小鼠血小板衍生生长因子B(PDGFB)检测试剂盒96t/48t
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