在小鼠肽聚糖识别蛋白1(PGLYRP1)检测试剂盒中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18~24小时。蛋白质包被的最适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值最大而蛋白量最少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
(3) 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。
实验原理
小鼠肽聚糖识别蛋白1(PGLYRP1)检测试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中
TLR水平。用纯化的抗体包被微孔
板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入
TLR抗原、生物素化的抗人
TLR抗体、HRP
标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下
转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的TLR呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。试剂盒组成及试剂配制
小鼠肽聚糖识别蛋白1(PGLYRP1)检测试剂盒相关如下:
ELISA Kit for Leukotriene A4 Hydrolase (LTA4H) 小鼠白三烯A4水解酶(LTA4H)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Peptidoglycan Recognition Protein 1 (PGLYRP1) 小鼠肽聚糖识别蛋白1(PGLYRP1)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Agouti Related Protein (AGRP) 小鼠野鼠色基因相关蛋白(AGRP)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Procollagen C Proteinase Enhancer 1 (PCPE1) 小鼠前胶原C端蛋白酶增强子1(PCPE1)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Ligand 小鼠肿瘤坏死因子配体超家族成员13(TNFSF13)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Fibroblast Activation Protein Alpha (FAPa) 小鼠成纤维细胞激活蛋白α(FAPα)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Lecithin Cholesterol Acyltransferase (LCAT) 小鼠卵磷脂胆固醇脂酰转移酶(LCAT)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Interleukin 6 Receptor (IL6R) 小鼠白介素6受体(IL6R)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Eosinophil Peroxidase (EPX) 小鼠嗜酸性粒细胞过氧化物酶(EPX)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Replication Initiator 1 (REPIN1) 小鼠复制启动因子1(REPIN1)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Activating Transcription Factor 3 (ATF3) 小鼠转录激活因子3(ATF3)检测试剂盒96t/48t小鼠肽聚糖识别蛋白1(PGLYRP1)检测试剂盒
ELISA Kit for ATPase, Na+/K+ Transporting Beta 3 Polypeptide 小鼠钠/钾离子转运ATP酶β3肽(ATP1β3)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Catechol-O-Methyltransferase (COMT) 小鼠儿茶酚-O-甲基转移酶(COMT)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Collagen Type XII (COL12) 小鼠Ⅻ型胶原(COL12)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Ki-67 Protein (Ki67P) 小鼠Ki-67蛋白(Ki67P)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Biglycan (BGN) 小鼠双糖链蛋白聚糖(BGN)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Reticulocalbin 2 (RCN2) 小鼠网钙蛋白2(RCN2)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Low Density Lipoprotein Receptor Related 小鼠低密度脂蛋白受体相关蛋白1(LRP1)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Cytochrome P450 3A4 (CYP3A4) 小鼠细胞色素P450家族成员3A4(CYP3A4)检测试剂盒96t/48t
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