在小鼠转化受体电位阳离子通道亚家族V成员1(TRPV1)检测试剂盒中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18~24小时。蛋白质包被的最适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值最大而蛋白量最少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
(3) 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取小鼠转化受体电位阳离子通道亚家族V成员1(TRPV1)检测试剂盒“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。
实验原理
小鼠转化受体电位阳离子通道亚家族V成员1(TRPV1)检测试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中
TLR水平。用纯化的抗体包被微孔
板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入
TLR抗原、生物素化的抗人
TLR抗体、HRP
标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下
转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的TLR呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。试剂盒组成及试剂配制
小鼠转化受体电位阳离子通道亚家族V成员1(TRPV1)检测试剂盒相关如下:
ELISA Kit for Carboxypeptidase B1, Tissue (CPB1) 大鼠羧肽酶B1(CPB1)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Insulin Degrading Enzyme (IDE) 大鼠胰岛素降解酶(IDE)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Stanniocalcin 1 (STC1) 大鼠斯钙素1(STC1)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Filamin Binding LIM Protein 1 (FBLIM1) 大鼠丝蛋白结合LIM蛋白1(FBLIM1)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Tyrosinase (TYR) 大鼠酪胺酸酶(TYR)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Kallikrein 6 (KLK6) 大鼠激肽释放酶6(KLK6)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Chromogranin B (CHGB) 大鼠嗜铬蛋白B(CHGB)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Pregnane X Receptor (PXR) 大鼠孕烷X受体(PXR)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Phosphofructokinase, Muscle (PFKM) 大鼠肌肉磷酸果糖激酶(PFKM)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Fibrinopeptide B (FPB) 大鼠纤维蛋白肽B(FPB)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Peripheral Myelin Protein 22 (PMP22) 大鼠外周鞘磷脂蛋白22(PMP22)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for NADH Dehydrogenase, Quinone 1 (NQO1) 大鼠醌NADH脱氢酶1(NQO1)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Coagulation Factor XI (F11) 大鼠凝血因子Ⅺ(F11)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Cystathionine Gamma Lyase (CSE) 大鼠细胞胱硫醚γ裂解酶(CSE)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Thymic Stromal Lymphopoietin (TSLP) 大鼠胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Dickkopf Related Protein 1 (DKK1) 大鼠Dickkopf相关蛋白1(DKK1)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Secreted Frizzled Related Protein 1 (SFRP1) 大鼠分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Doublecortin (DCX) 大鼠双肾上腺皮质激素(DCX)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Ephrin Type B Receptor 3 (EPHB3) 大鼠肝配蛋白B受体3(EPHB3)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Myotubularin Related Protein 9 (MTMR9) 大鼠肌微管素相关蛋白9(MTMR9)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Transient Receptor Potential 大鼠转化受体电位阳离子通道亚家族M成员4(TRPM4)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Corticotropin Releasing Hormone 大鼠促肾上腺皮质素释放激素受体2(CRHR2)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Mitogen Activated Protein Kinase Kinase 大鼠丝裂原激活蛋白激酶激酶激酶6(MAP3K6)检测试剂盒96t/48t
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