在小鼠Jagged 1蛋白(JAG1)检测试剂盒中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18~24小时。蛋白质包被的最适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,小鼠Jagged 1蛋白(JAG1)检测试剂盒观察阳性标本的OD值。选择OD值最大而蛋白量最少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
(3) 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。
实验原理
小鼠Jagged 1蛋白(JAG1)检测试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中
TLR水平。用纯化的抗体包被微孔
板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入
TLR抗原、生物素化的抗人
TLR抗体、HRP
标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下
转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的TLR呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。试剂盒组成及试剂配制
小鼠Jagged 1蛋白(JAG1)检测试剂盒相关如下:
ELISA Kit for Nuclear Mitotic Apparatus Protein 1 (NUMA1) 人核有丝分裂器蛋白1(NUMA1)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein A2 (S100A2) 人S100钙结合蛋白A2(S100A2)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Kinesin Family, Member 14 (KIF14) 人驱动蛋白家族成员14(KIF14)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Secretogranin III (SCG3) 人分泌粒蛋白Ⅲ(SCG3)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Leukocyte Associated Immunoglobulin Like 人白细胞关联免疫球蛋白样受体1(LAIR1)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Interleukin 31 (IL31) 人白介素31(IL31)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Interleukin 8 Receptor Beta (IL8Rb) 人白介素8受体β(IL8Rβ)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Kruppel Like Factor 2, Lung (KLF2) 人Kruppel样因子2(KLF2)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Neuropeptide Y Receptor Y5 (NPY5R) 人神经肽Y受体Y5(NPY5R)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Neuropeptide Y Receptor Y1 (NPY1R) 人神经肽Y受体Y1(NPY1R)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Neuropeptide Y Receptor Y2 (NPY2R) 人神经肽Y受体Y2(NPY2R)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Lymphotoxin Beta Receptor (LTbR) 人淋巴毒素β受体(LTβR)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Phospholipase A2, Group X (PLA2G10) 人Ⅹ组磷脂酶A2(PLA2G10)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Defensin Beta 103A (DEFb103A) 人防御素β103A(DEFβ103A)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 8, Androgen Induced (FGF8) 人成纤维细胞生长因子8(FGF8)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Amiloride Sensitive Sodium Channel 人阿米洛利敏感钠离子通道蛋白1γ(SCNN1γ)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Amiloride Sensitive Sodium Channel 人阿米洛利敏感钠离子通道蛋白1β(SCNN1β)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Dynein, Axonemal, Heavy Chain 11 (DNAH11) 人动力蛋白轴丝重链11(DNAH11)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Receptor 人肿瘤坏死因子受体超家族成员1B(TNFRSF1B)检测试剂盒96t/48t
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