在小鼠多聚蛋白2(MMRN2)检测试剂盒中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18~24小时。蛋白质包被的最适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,小鼠多聚蛋白2(MMRN2)检测试剂盒观察阳性标本的OD值。选择OD值最大而蛋白量最少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
(3) 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。
实验原理
小鼠多聚蛋白2(MMRN2)检测试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中
TLR水平。用纯化的抗体包被微孔
板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入
TLR抗原、生物素化的抗人
TLR抗体、HRP
标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下
转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的TLR呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。试剂盒组成及试剂配制
小鼠多聚蛋白2(MMRN2)检测试剂盒相关如下:
ELISA Kit for Formin Binding Protein 1 (FNBP1) 人形成素结合蛋白1(FNBP1)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Sarcolipin (SLN) 人肌脂蛋白(SLN)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for D-Dopachrome Tautomerase (DDT) 人D-多巴色素变位酶(DDT)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Collagen Type XIII (COL13) 人ⅩⅢ型胶原(COL13)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Ubiquitin Associated Protein 2 (UBAP2) 人泛素关联蛋白2(UBAP2)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Uroplakin 3A (UPK3A) 人尿溶蛋白3A(UPK3A)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Family With Sequence Similarity 20, Member A 人序列相似家族20成员A(FAM20A)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Cysteinyl Leukotriene Receptor 1 (CYSLTR1) 人半胱氨酰白三烯受体1(CYSLTR1)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Carbon Catabolite Repression 4 Like Protein 人碳分解代谢物阻遏4样蛋白(CCRN4L)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Glutaminase (GLS) 人谷氨酰胺酶(GLS)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Phosphodiesterase 4D, cAMP Specific (PDE4D) 人磷酸二酯酶4D(PDE4D)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Carbohydrate Sulfotransferase 9 (CHST9) 人糖磺基转移酶9(CHST9)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Cytochrome P450 3A4 (CYP3A4) 人细胞色素P450家族成员3A4(CYP3A4)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for T-Box Protein 3 (TBX3) 人T-框蛋白3(TBX3)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Lipase, Gastric (LIPF) 人胃脂酶(LIPF)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for C-Mer Proto Oncogene Tyrosine Kinase (MERTK) 人C-Mer原癌基因酪氨酸激酶(MERTK)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Peptidylglycine Alpha Amidating Monooxygenase 人肽酰甘氨酸α酰胺化单氧酶(PAM)检测试剂盒96t/48t
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