在小鼠钙离子转运ATP酶A2(ATP2A2)检测试剂盒中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18~24小时。蛋白质包被的最适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,小鼠钙离子转运ATP酶A2(ATP2A2)检测试剂盒观察阳性标本的OD值。选择OD值最大而蛋白量最少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
(3) 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。
实验原理
小鼠钙离子转运ATP酶A2(ATP2A2)检测试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中
TLR水平。用纯化的抗体包被微孔
板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入
TLR抗原、生物素化的抗人
TLR抗体、HRP
标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下
转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的TLR呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。试剂盒组成及试剂配制
小鼠钙离子转运ATP酶A2(ATP2A2)检测试剂盒相关如下:
ELISA Kit for Klotho Beta (KLb) 人Klothoβ蛋白(KLβ)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Prolyl-4-Hydroxylase Alpha Polypeptide II 人脯氨酰4-羟化酶α多肽Ⅱ(P4Hα2)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Response Gene To Complement 32 (RGC32) 人补体应答基因32(RGC32)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Keratin 9 (KRT9) 人角蛋白9(KRT9)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Syntaxin 2 (STX2) 人突触融合蛋白2(STX2)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Solute Carrier Family 3, Member 2 (SLC3A2) 人溶质载体家族3成员2(SLC3A2)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Osteocrin (OSTN) 人骨织素(OSTN)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Neuroepithelial Cell Transforming Gene 1 (NET1) 人神经上皮细胞转化基因1(NET1)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Moesin (MSN) 人膜突蛋白(MSN)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Dermatan Sulfate Epimerase (DSE) 人硫酸皮肤素差向异构酶(DSE)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for G Protein Coupled Receptor, Family C, Group 5, 人G蛋白偶联受体家族C5组成员A(GPRC5A)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Chemokine C-X-C-Motif Receptor 6 (CXCR6) 人趋化因子C-X-C-基元受体6(CXCR6)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Transient Receptor Potential Cation 人转化受体电位阳离子通道亚家族V成员2(TRPV2)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Leucyl/Cystinyl Aminopeptidase (LNPEP) 人亮氨酰/半胱氨酰氨肽酶(LNPEP)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Polycomb Group Ring Finger Protein 4 (PCGF4) 人多梳家族环指蛋白4(PCGF4)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Tripeptidyl Peptidase I (TPP1) 人三肽基肽酶Ⅰ(TPP1)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Carbonic Anhydrase VB, Mitochondrial (CA5B) 人碳酸酐酶ⅤB(CA5B)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Ephrin A3 (EFNA3) 人肝配蛋白A3(EFNA3)检测试剂盒96t/48t
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