在小鼠类胰蛋白酶(TPS)检测试剂盒中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18~24小时。蛋白质包被的最适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,小鼠类胰蛋白酶(TPS)检测试剂盒观察阳性标本的OD值。选择OD值最大而蛋白量最少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
(3) 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。
实验原理
小鼠类胰蛋白酶(TPS)检测试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中
TLR水平。用纯化的抗体包被微孔
板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入
TLR抗原、生物素化的抗人
TLR抗体、HRP
标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下
转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的TLR呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。试剂盒组成及试剂配制
小鼠类胰蛋白酶(TPS)检测试剂盒相关如下:
ELISA Kit for Defensin Alpha 1, Neutrophil (DEFa1) 人防御素α1(DEFα1)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Lipocalin 1 (LCN1) 人脂质运载蛋白1(LCN1)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Toll Like Receptor 4 (TLR4) 人Toll样受体4(TLR4)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Interleukin 17F (IL17F) 人白介素17F(IL17F)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Platelet Activating Factor Acetylhydrolase 2 人血小板激活因子乙酰水解酶2(PAFAH2)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 1 人血管内皮生长因子受体1(VEGFR1)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Salusin Beta 人Salusinβ蛋白(Salusinβ)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for O-6-Methylguanine DNA Methyltransferase (MGMT) 人O-6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(MGMT)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Interleukin 28B (IL28B) 人白介素28B(IL28B)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Interleukin 29 (IL29) 人白介素29(IL29)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Interleukin 4 Receptor (IL4R) 人白介素4受体(IL4R)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Apolipoprotein C4 (APOC4) 人载脂蛋白C4(APOC4)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 14 (CD14) 人CD14分子(CD14)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Alpha-Fetoprotein Lens Culinaris Agglutinin 3 (aFPL3) 人甲胎蛋白异质体3(αFPL3)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Metallothionein 1 (MT1) 人金属硫蛋白1(MT1)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Arginase (Arg) 人精氨酸酶(Arg)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Deoxyribonuclease I (DNASE1) 人脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNASE1)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Cadherin, Osteoblast (CDHOB) 人造骨细胞钙黏蛋白(CDHOB)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Antidiuretic Hormone (ADH) 人抗利尿激素(ADH)检测试剂盒96t/48t
ELISA Kit for Phospholipase A1 (PLA1) 人磷脂酶A1(PLA1)检测试剂盒96t/48t
小鼠类胰蛋白酶(TPS)检测试剂盒 信息由上海沪震生物科技有限公司为您提供,如您想了解更多关于小鼠类胰蛋白酶(TPS)检测试剂盒 报价、型号、参数等信息,欢迎来电或留言咨询。除供应小鼠类胰蛋白酶(TPS)检测试剂盒 外,上海沪震生物科技有限公司还可为您提供SEK1/MKK4 (Ab-261) 抗体、Histone H3.1 (Ab-10) 抗体、HDAC2 (Ab-394) 抗体等产品,公司有专业的客户服务团队,是您值得信赖的合作伙伴。