小鼠尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)检测试剂盒中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:
(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18~24小时。蛋白质包被的最适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值最大而蛋白量最少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
(3) 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。小鼠尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)检测试剂盒然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。
(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。
小鼠尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)检测试剂盒实验原理
应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中
TLR水平。用纯化的抗体包被微孔
板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入
TLR抗原、生物素化的抗人
TLR抗体、HRP
标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下
转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的TLR呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。试剂盒组成及试剂配制
小鼠尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)检测试剂盒相关如下:
Rat Anti-trypsin,AT ELISAkit 大鼠抗胰蛋白酶(AT)检测试剂盒96t/48t
Rat islet cell antibody,ICA ELISAkit 大鼠胰岛细胞抗体(ICA)检测试剂盒96t/48t
Rat Kidney injury molecule 1,Kim-1 ELISAkit 大鼠肾损伤分子1(Kim-1)检测试剂盒96t/48t
Rat anti-Monocyte antibody,AMA ELISAkit 大鼠抗单核细胞抗体(AMA)检测试剂盒96t/48t
Rat oxidized lowdensity lipoprotein antibody,OLAb ELISAkit 大鼠氧化低密度脂蛋白抗体(OLAb)检测试剂盒96t/48t
Rat Anti-Smooth Muscle Antibody,ASMA ELISAkit 大鼠抗平滑肌抗体(ASMA)检测试剂盒96t/48t
Rat nuclear factor-κB p65,NF-κB p65 ELISAkit 大鼠核因子κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)检测试剂盒96t/48t
Rat Thrombin activatable fibrinolysis 大鼠纤溶抑制因子/凝血酶激活的纤溶抑制物(TAFI)检测试剂盒96t/48t
Rat platelet membrane glycoprotein ⅡbⅢa,GP- 大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)检测试剂盒96t/48t
Rat free fatty acids,FFA ELISAkit 大鼠游离脂肪酸(FFA)检测试剂盒96t/48t
Rat thrombospondin 1,TSP-1 ELISAkit 大鼠血小板反应蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)检测试剂盒96t/48t
Rat osteonectin,ON ELISAkit 大鼠骨粘连蛋白(ON)检测试剂盒96t/48t
Rat Folic acid,FA ELISAkit 大鼠叶酸(FA)检测试剂盒96t/48t
Rat histon-H2b ELISAkit 大鼠组蛋白H2b(histon-H2b)检测试剂盒96t/48t
Rat N-terminal pro-brain natriuretic peptide,NT-proBNP ELISAkit 大鼠N端前脑钠素(NT-proBNP)检测试剂盒96t/48t
Rat glucocorticoid receptor,GR ELISAkit 大鼠糖皮质类固醇受体(GR)检测试剂盒96t/48t
Rat Luteinizing Hormone-Releasing Hormone,LHRH ELISAkit 大鼠黄体生成素释放激素(LHRH)检测试剂盒96t/48t
Rat 8-iso prostaglandin,8-iso-PG ELISAkit 大鼠8异前列腺素(8-iso-PG)检测试剂盒96t/48t
Rat interferon-inducible protein 16,IFI16/p16 大鼠γ干扰素诱导蛋白16/p16(IFI16/p16)检测试剂盒96t/48t
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