人卵巢微血管内皮细胞
商品属性:
产品名称 | 人卵巢微血管内皮细胞 | 组织来源 | 卵巢组织 |
产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 产品货号 | A01X1390 |
包装 | 瓶装 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
细胞简介:
人卵巢微血管内皮细胞分离自卵巢组织;卵巢是雌性动物的生殖器官,卵巢的功能是产生卵以及类固醇激素。卵巢的位置与睾丸相同,仅左侧发育(右侧已退化),呈葡萄状,均为处于不同发育时期的卵泡,卵泡呈黄色,卵巢表面密布血管。卵巢的大小与年龄和产卵期有关。大多数脊椎动物有两个卵巢,但是部分鱼类的两个卵巢融合为单个结构,而所有鸟类只有左侧卵巢有机能。卵巢是位于子宫两侧的一对卵圆形的生殖器官,它的外表有一层上皮组织,其下方有薄层的结缔组织。卵巢的内部结构可分为皮质和髓质。皮质位于卵巢的周围部分,主要由卵泡和结缔组织构成;髓质位于中央,由疏松结缔组织构成,其中有许多血管、淋巴管和神经。微血管又称毛细血管。分布于各种组织和细胞间的最微细的血管。介于微动脉和微静脉之间。平均直径7~9微米,数量极多,成网状分布。管壁由一层内皮细胞及一薄层基膜组成,厚约0.5微米。基膜外面有薄层结缔组织,其中有纤维细胞、巨噬细胞和周细胞等。最细的微血管由一个内皮细胞围成管腔,较粗的微血管由2~3个内皮细胞围成。分布于肌肉组织、神经组织和结缔组织中的微血管,内皮细胞间为缝隙连接(缝隙宽150埃),称连续微血管。血管内皮细胞在器官和组织的结构和功能上起着非常重要的作用。并与多种疾病的发生与发展有关。近年来血管内皮细胞在炎症、休克等一系列病理生理改变中的重要性愈来愈受到人们的重视。研究发现,不同来源的内皮细胞在生物学特征、结构和功能等方面均存在一定差别,而同是微血管内皮细胞,它们又存在器官和组织的特异性。
方法简介:
公司实验室分离的人卵巢微血管内皮细胞采用胶原酶-中性蛋白酶混合消化法结合密度梯度离心法、最后通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×105cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的人卵巢微血管内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
包被条件 PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 内皮细胞样
传代特性 可传3代左右
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
注意事项:
1)原代培养的分离细胞在初次接触体外环境时,虽然被分散成单个细胞,但它们之间的互相影响还是存在的, 而且这种影响对细胞能否存活是非常重要的。在这些细胞之间能产生一些促生长的活性物质, 使细胞彼此互相促进存活和生长。如果接种的细胞密度过低, 细胞之间的促生长作用很小, 虽然营养物质很充足, 也很难使细胞适应从体内的组织环境到被分散后进入独立生存环境的变化过程。 如果接种的细胞密度过大,会导致营养物质供应不足, 代谢废物积累较快需要经常换液和传代。
2)原代培养时初始培养在组织分散和分离细胞时细胞可能会受到严重的损伤。适当增大原代培养接种的细胞密度, 给培养的细胞提供更多的类似于在体内时细胞之间的相互作用, 会极大提高原代培养的细胞在体外存活率。待细胞适应体外环境后进行传代培养时再以较低的密度接种和培养。
3)由于细胞之间的相互的内在联系被打破,分离细胞在体外培养时经历的生存环境改变很大,在体外存活和生长的难度相应增加。 对于贴壁依赖性细胞来说,尽快使接种的细胞贴壁,是决定培养能否成功的关键。可以在接种后先将培养瓶置培养箱内培养 3h 到 5h,由于细胞悬液中带有少量培养液, 细胞即可以维持存活, 又可以很快接触到培养瓶底壁, 是细胞迅速黏附于底物,待细胞贴壁后,再补足培养液继续培养。
4)分离细胞培养法—悬浮型细胞培养。
操作过程:
1)制备细胞悬浊液,计数并用培养液调整细胞密度。
2)在培养皿中加入足够的培养液。
3)将欲接种的细胞接种到培养器皿中。
4)在培养皿内放入一个有聚四氟乙烯包被的磁棒。将培养皿封口,送入恒温箱内。在磁力搅拌器上边搅拌边培养。若接种培养瓶或试管中,封口后可将培养器皿固定在恒温摇床上,边摇动边培养,无需放置磁棒。有些细胞也可以不用磁棒或磁力搅拌器,也不必使用恒温摇床,接种于预先用硅脂包被的培养器皿内直接在培养箱中静置培养即可。
5)培养液略呈黄色换液。吸出部分旧培养液,加入新鲜培养液即可。
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