小鼠结缔组织细胞胸苷激酶缺陷株；L-M(TK-)

小鼠结缔组织细胞胸苷激酶缺陷株；L-M(TK-)

商品介绍：

形态特性  成纤维细胞样

生长特性 贴壁生长

特征特性  L-M (TK-)细胞是L-M（ATCC CCL-1.2 ）细胞系的衍生株，具有抗5-溴脱氧尿核苷（5-bromo-2-deoxyuridine,BUdR）、缺乏胸腺嘧啶核苷激酶（thymidine kinase mutant）的特性，广泛用于遗传学、生物化学基础研究。也可用在体细胞杂交、基因转移等实验研究中。

培养条件  DMEM-H: Dulbecco＇s Modified Eagle＇s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS　

传代方法  1:3传代,2-3天传一代

传代情况 C36

冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS　

支原体检测 阴性　

STR

同工酶 同工酶鉴定

染色体

使用权限 A类

细胞系要求及注意事项：

实验中建立细胞系有以下要求：

1、组织来源：

细胞供体所属物种，来自人体或者动物；

个体性别、年龄；取材的器官或组织。

如系肿瘤组织，应说明临床和病理诊断，以及病li号等。

2、细胞生物学检测：

了解细胞一般和特殊的生物学性状，如细胞一般形态，特异结构，细胞生长曲线和分裂指数，倍增时间，接种率等。

如为肿瘤细胞，为说明来源于原肿瘤组织并保持恶性，须做软琼脂培养，异体接种致瘤和对正常组织侵润力等实验。

3、培养条件和方法：

应说明细胞系（或株）适应的生存环境，即指明使用的培养基、血清种类、用量以及适宜PH值。

实验中建立细胞系需要注意事项：

1. 细胞的来源和健康程度需要保证，不能使用受到污染或者有疾病的细胞。

2. 实验室需要保持清洁和卫生，定期进行消毒，以避免细胞受到感染。

3. 细胞需要充足的营养和生长因子，以促进其生长和繁殖。

4. 温度和湿度的控制对于细胞的生长也非常重要，实验室需要有恒温恒湿设备。

5. 实验室需要配备各种安全设备，例如防火设备、急救箱等，保证实验的顺利进行和人员的安全。

细胞培养的步骤：

细胞培养前的准备：

细胞变质的征象包括核周出现颗粒、细胞与基质解离以及细胞质空泡形成。

这些变质征象可能为多种原因所致，例如：培养物污染、细胞系衰老或培养基中存在毒性物质，或者这些征象仅表明培养物需要更换培养基。

变质严重时将会成为不可逆的变化。

细胞培养通风橱的消毒及布局

保持细胞培养通风橱内的整洁有序，将所有物品置于直视范围内。

向放入通风橱内的所有物品喷洒70%乙醇，擦拭清洁进行消毒。

在通风橱中部开阔处放置细胞培养容器；移液器置于右前方易于取用；试剂和培养基置于右后方便于吸取；试管架置于中后部；小型容器置于左后部用于盛放废液。

培养瓶/皿等物品的无菌操作

细胞培养污染物主要分为两类：

化学污染物,如培养基、血清和水中的杂质、内毒素、增塑剂和去污剂。

生物污染物，如细菌、霉菌、酵母、病毒、支原体以及其他细胞系的交叉污染。

可通过充分了解污染源以及采用良好的无菌技术，降低污染发生的频率和严重程度。

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