ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件,可设计出各种不同类型的检测方法。主要有:直接法、双抗体夹心法、间接法、竞争法、双位点一步法、捕获法、应用亲和素和生物素系统(ABS)等。
ELISA必须遵守以下3个核心原理:(1)抗原或抗体能吸附于固相载体表面,并保持其免疫学活性;(2)抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物,而此种酶结合物仍能保持其免疫学和酶学活性;(3)酶结合物与相应抗原或抗体结合后,可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反应的存在,而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的,可根据已知浓度的抗原或抗体的颜色反应的深浅绘制标准曲线并依此计算出未知样品中抗体或抗原的浓度。
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