关于免疫荧光ELISA试剂盒实验要点详解

    将荧光素标记在相应的抗体上，直接与相应抗原反应。ELISA试剂盒其优点是方法简便、特异性高，非特异性荧光染色少。缺点是敏感性偏低；而且每检查一种抗原就需要制备一种荧光抗体。

　　免疫荧光ELISA试剂盒体技术（荧光显微镜技术）抗原抗体反应后，利用荧光显微镜判定结果的检测方法。抗原抗体反应后，利用特殊仪器测定荧光强度而推算被测物浓度的检测方法 。

（1）荧光物质 　许多物质都可产生荧光现象，ELISA试剂盒但并非都可用作荧光色素。只有那些能产生明显的荧光并能作为染料使用的有机化合物才能称为免疫荧光色素或荧光染料。

（2）异硫氰酸荧光素（fluoresceinisothiocyanate，FITC）为黄色或橙黄色结晶粉末，易溶于水或酒精等溶剂。分子量为389.4，最大吸收光波长为490--495nm，最大发射光波长520--530nm，呈现明亮的黄绿色荧光，结构式如下： 　　有两种同分异结构，其中异构体Ⅰ型在效率、稳定性、与蛋白质结合能力等方面都更好，在冷暗干燥处可保存多年，是应用最广泛的荧光素。

免疫荧光ELISA试剂盒技术特点：

该技术的主要特点是：特异性强、敏感性高、速度快。

主要缺点是：非特异性染色问题尚未完全解决，结果判定的客观性不足，技术程序也还比较复杂。 　　　荧光免疫法按反应体系及定量方法不同，还可进一步分做若干种。与放射免疫法相比，荧光免疫法无放射性污染，并且大多操作简便，便于推广。国外生产的TDM用试剂盒，有相当一部分即属于此类，并且还有专供TDM荧光偏振免疫分析用的自动分析仪生产。 　　
    ELISA试剂盒由于一般荧光测定中的本底较高等问题，荧光免疫技术用于定量测定有一定困难。近年来发展了几种特殊的荧光免疫测定，与酶免疫测定和放射免疫分析一样，在临床检验中应用。