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万疆生物为您讲解ELISA实验不可忽视的小细节

2014-11-24 09:16

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资料摘要:

ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件,可设计出各种不同类型的检测方法。主要有:直接法、双抗体夹心法、间接法、竞争法、双位点一步法、捕获法、应用亲和素和生物素系统(ABS)等。 ELISA必须遵守以下3个核心原理:(1)抗原或抗体能吸附于固相载体表面,并保持其免疫学活性;(2)抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物,而此种酶结合物仍能保持其免疫学和酶学活性;(3)酶结合物与相应抗原或抗体结合后,可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反应的存在,而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的,可根据已知浓度的抗原或抗体的颜色反应的深浅绘制标准曲线并依此计算出未知样品中抗体或抗原的浓度。

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检测原理: 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人Pro-MMP-1抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的人Pro-MMP-1会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人Pro-MMP-1抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人Pro-MMP-1抗体与结合在包被抗体上的人Pro-MMP-1结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,Pro-MMP-1浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中Pro-MMP-1的浓度。

试剂盒组成: 中文名称 英文名称 规格 保存条件 ELISA 酶标板(可拆卸) Micro ELISA Plate(Dismountable) 8×12 / 8×6 * 4℃/-20℃ # 冻干标准品 Reference Standard 2/1 支* 4℃/-20℃ # 标准品&样品稀释液 Reference Standard & Sample Diluent 1 瓶 20mL/12mL * 4℃ 浓缩生物素化抗体 Concentrated Biotinylated Detection Ab 1 支 120μL/70μL * 4℃/-20℃ # 生物素化抗体稀释液 Biotinylated Detection Ab Diluent 1 瓶 10mL/6mL * 4℃ 浓缩 HRP 酶结合物 Concentrated HRP Conjugate 1 支 120μL/70μL * 4℃(避光) 酶结合物稀释液 HRP Conjugate Diluent 1 瓶 10mL/6mL * 4℃ 浓缩洗涤液(25×) Concentrated Wash Buffer (25×) 1 瓶 30mL/16mL * 4℃ 底物溶液(TMB) Substrate Reagent 1 瓶 10mL/6mL * 4℃(避光) 反应终止液 Stop Solution 1 瓶 10mL/6mL * 4℃ 封板覆膜 Plate Sealer 5/3 张* 产品说明书 Product Description 1 份 质检报告 Certificate of Analysis 1 份 兔肌红蛋白elisa试剂盒由上海万疆生物专业提供!欢迎咨询!

产品名称: IL1B Polyclonal Antibody 别称: IL1-BETA, IL1F2 货号: EBP20136 来源: Rabbit 亚型: IgG 纯化方法 Affinity purification 组分: PBS with 0.05% sodium azide, 50% glycerol, pH7.3 储存条件: Store at -20℃ . Avoid freeze / thaw cycles. 应用 用途: WB, ELISA 反应性: rat 推荐稀释比: WB 1:100 – 1:400 免疫原信息 名称: Purified recombinant fragment of Rat IL1B expressed in E. Coli 预估 MW: 31kDa 实测 MW: 35kDa 图片 Western blot analysis of human recombinant IL-1β, using IL1B Polyclonal Antibody at dilution of 1:200

BW02111B 大鼠迟现抗原(VLA)ELISA试剂盒 BW02112B 大鼠降钙素(CT)ELISA试剂盒 BW02113B 大鼠骨钙素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA试剂盒 BW02114B 大鼠促甲状腺素(TSH)ELISA试剂盒 BW02115B 大鼠皮质醇(Cortisol)ELISA试剂盒 BW02116B 大鼠雌二醇(E2)ELISA试剂盒 BW02117B 大鼠脱氢表雄酮硫酸酯(DHEA-S)ELISA试剂盒 BW02118B 大鼠睾酮(T)ELISA试剂盒 BW02119B 大鼠游离睾酮(F-TESTO)ELISA试剂盒 BW02120B 大鼠雄烯二酮(ASD)ELISA试剂盒 BW02121B 大鼠雌三醇(E3)ELISA试剂盒 BW02122B 大鼠17羟孕酮(17-OHP)ELISA试剂盒 BW02123B 大鼠三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒 BW02124B 大鼠甲状腺素(T4)ELISA试剂盒 BW02125B 大鼠游离甲状腺素(FT4)ELISA试剂盒 BW02126B 大鼠游离三碘甲状腺原氨酸(Free-T3)ELISA试剂盒 BW02127B 大鼠新生甲状腺素(NN-T4)ELISA试剂盒 BW02128B 大鼠胰岛素(INS)ELISA试剂盒 BW02129B 大鼠C肽(C-Peptide)ELISA试剂盒 BW02130B 大鼠绒毛膜促性腺激素(CG)ELISA试剂盒 BW02131B 大鼠促黄体激素(LH)ELISA试剂盒 BW02132B 大鼠抗心肌抗体(AMA)ELISA试剂盒 BW02133B 大鼠抗中性粒/中心体抗体(ACA)ELISA试剂盒 BW02134B 大鼠磷脂酰肌醇抗体IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)ELISA试剂盒 BW02135B 大鼠复合前列腺特异性抗原(CPSA)ELISA试剂盒 BW02136B 大鼠胰蛋白酶(trypsin)ELISA试剂盒 BW02137B 大鼠可溶性瘦素受体(sLR)ELISA试剂盒 BW02138B 大鼠窖蛋白Caveolin1(Cav-1)ELISA试剂盒 BW02139B 大鼠艾杜糖硫酸酯酶(IDS)ELISA试剂盒 BW02140B 大鼠烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA试剂盒

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