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大鼠组织因子(TF)elisa试剂盒-使用说明

2014-10-17 11:52

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资料摘要:

操作步骤 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为1800ng/L,1200ng/L ,600ng/L,300ng/L, 150ng/L)。 ?加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。 ?温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 ?配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。 ?洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。 ?加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。 ?温育:操作同3。 ?洗涤:操作同5。 ?显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟. ?终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。 ?测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。 详情请登录:http://www.shwanjiang.com/

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检测原理: 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人Pro-MMP-1抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的人Pro-MMP-1会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人Pro-MMP-1抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人Pro-MMP-1抗体与结合在包被抗体上的人Pro-MMP-1结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,Pro-MMP-1浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中Pro-MMP-1的浓度。

试剂盒组成: 中文名称 英文名称 规格 保存条件 ELISA 酶标板(可拆卸) Micro ELISA Plate(Dismountable) 8×12 / 8×6 * 4℃/-20℃ # 冻干标准品 Reference Standard 2/1 支* 4℃/-20℃ # 标准品&样品稀释液 Reference Standard & Sample Diluent 1 瓶 20mL/12mL * 4℃ 浓缩生物素化抗体 Concentrated Biotinylated Detection Ab 1 支 120μL/70μL * 4℃/-20℃ # 生物素化抗体稀释液 Biotinylated Detection Ab Diluent 1 瓶 10mL/6mL * 4℃ 浓缩 HRP 酶结合物 Concentrated HRP Conjugate 1 支 120μL/70μL * 4℃(避光) 酶结合物稀释液 HRP Conjugate Diluent 1 瓶 10mL/6mL * 4℃ 浓缩洗涤液(25×) Concentrated Wash Buffer (25×) 1 瓶 30mL/16mL * 4℃ 底物溶液(TMB) Substrate Reagent 1 瓶 10mL/6mL * 4℃(避光) 反应终止液 Stop Solution 1 瓶 10mL/6mL * 4℃ 封板覆膜 Plate Sealer 5/3 张* 产品说明书 Product Description 1 份 质检报告 Certificate of Analysis 1 份 兔肌红蛋白elisa试剂盒由上海万疆生物专业提供!欢迎咨询!

产品名称: IL1B Polyclonal Antibody 别称: IL1-BETA, IL1F2 货号: EBP20136 来源: Rabbit 亚型: IgG 纯化方法 Affinity purification 组分: PBS with 0.05% sodium azide, 50% glycerol, pH7.3 储存条件: Store at -20℃ . Avoid freeze / thaw cycles. 应用 用途: WB, ELISA 反应性: rat 推荐稀释比: WB 1:100 – 1:400 免疫原信息 名称: Purified recombinant fragment of Rat IL1B expressed in E. Coli 预估 MW: 31kDa 实测 MW: 35kDa 图片 Western blot analysis of human recombinant IL-1β, using IL1B Polyclonal Antibody at dilution of 1:200

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