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提取的RNA总是降解? 这样解决!
RNA提取是很多科研实验中非常重要的前置环节,获得一个完整的RNA才能为下游各类实验奠定坚实的基础。为了确保RNA的完整性,从样品采集到提取RNA,我们会采取很多手段保护其不受降解
生物产业
2024/06/17
远慕分享细菌分离纯化的详细方法
培养基与菌种分离是从含有多种微生物的样品中获得纯种微生物的操作技术。菌种分离主要在培养皿上进行,常用的方法是稀释法和划线法。使用这两种方法的目的是是微生物的一个个体通过繁殖,在固体培养基上长出肉眼能见的群体,根据培养特征,用接种针调取所需菌种并在显微镜下检查,证明为单一形状的菌体。常用的培养基是选择培养基。
生物产业
2023/09/18
预防RNA酶污染,让实验不再失败!
RNA实验中,最关键的因素是分离得到全长的RNA。而实验失败的主要原因是核糖核酸酶(RNA酶)的污染。由于RNA酶广泛存在而稳定,一般反应不需要辅助因子。因而RNA制剂中只要存在少量的RNA酶就会引起RNA在制备与分析过程中的降解,而所制备的RNA的纯度和完整性又可直接影响RNA分析的结果,所以RNA的制备与分析操作难度极大。
生物产业
2023/09/14
酶抑制剂的作用和抑制原理说明
酶反应抑制剂,简称“抑制剂”。一类能降低酶促反应速率的物质。会使酶的必需基团或活性部位的性质和结构发生改变,从而导致酶活性降低或丧失。按与酶结合的强度和方式,分可逆抑制剂和不可逆抑制剂。
生物产业
2023/07/24
从冻存的细胞提取RNA操作步骤
一般情况下提取的RNA已经足够,而且在逆转录过程中RNA的质量要远较RNA的数量更重要,一般仅取上清的上1/2左右足矣,这样可最大限度避免对于中间蛋白相的扰动
生物产业
2023/07/04
提取RNA时如何去除DNA的污染
注意事项: 从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响第一链的合成,也不影响PCR反应。 匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。 分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机,2600×g离心30-60分钟。 预期产量:1mg组织或1×106细胞提取RNA分别为: 肝和脾6-10μg,肾3-4μg,骨骼肌和脑组织1-1.5μg,胎盘1-4μg,上皮细胞8-15μg,成纤维细胞5-7μg 。
生物产业
2022/10/10
上海远慕生物科技有限公司
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