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ELISA试剂盒五大检测方法

fssy

2014/12/19 08:51

阅读:51

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    最近,站上关于ELISA试剂盒的讨论帖子非常多,今天也发表一下自己的一些看法,对ELISA的见解有不对的地方,希望指正或者直接拍砖。

首先,谈一下市场。首先RnD和Bender等一些知名品牌的ELISA试剂盒还是很值得信赖的,也得到了市场的认可,特别是RnD的盒子,我们卖的很好,就是价格好贵,经费不是很充裕的实验室难消费的起。国内的厂家,质量在灵敏度上和RnD的盒子还是有很大差距,但是有一点是可以肯定的,盒子反映的结果是公正客观的。还有一个缺点就是厂家可供选择的盒子种类比较少,主要集中在炎症细胞因子上。

    第二,谈一下如何灵活应用ELISA这个检测方法以及如何去挑选ELISA试剂盒。ELISA这个方法的原理,大家都很清楚,网上的资料一大堆。可真正用起来的时候,有时候就有点犯糊涂,我谈一下自己的理解。

1、有些客户会用OVA(卵清蛋白)做一些哮喘,过敏性肠炎的模型,后来会检测粘膜特异性的sIgA以及血清里面IgG,IgE等指标。当客户向我咨询购买这几个指标的盒子的时候,我很肯定地说这些指标的检测要你自己特制,不会有商品化的盒子出售的。

2、对于一些小分子的检测,比如前列腺素、糖皮质激素的检测,我的理解是要用竞争法ELISA去检测,也要购买采用这个方法的盒子。一般细胞因子的检测,都是采用常规的夹心法ELISA检测,因为因子分子量比较大,一般10几个KD左右,很容易找到两个或者多个抗原表位。而小分子很难找到两个不同的表位,也就决定了包被抗体和检测抗体无法同时结合小分子并固相化。解决方案就是酶标板上包被二抗,每个孔加入一定量的酶标的小分子,然后加样品,再加不带标记的检测抗体,显色底物。样品的目的小分子的含量越高,吸光度越低。

3、对于胰岛素的检测,我还是推荐millpore 旗下LInco公司的检测试剂盒,不管是放免还是ELISA,据说专利权在他们手中。

4、做实验面向的ELISA试剂盒种属主要是人,大鼠和小鼠,现在市面上鸡、牛、马、羊、兔各种指标的盒子都有售,真不知道这些抗体是怎么来的,。据我所了解,这些炎症指标还是有很大种属特异性的。

5、好多客户有个误区,拿来一个指标就想当然地尝试用ELISA去检测,其实应该多动脑,该检测活性的检测活性,该做western的做western。ELISA试剂盒检测方法简单,灵敏度高,

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