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血栓素B2ELISA试剂盒

2016-01-22 09:25

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血栓素B2ELISA试剂盒测定中,应对包被抗原或抗体的浓度和酶标抗原或抗体的浓度予以选择,以达到最合适的测定条件和节省测定费用。 1.酶标抗抗体工作浓度的选择 (1)用100ng/ml人IgG进行包被,洗涤。 (2)将酶标抗人IgG用稀释液作一系列稀释后分别加入已包被的孔中,保温、洗涤。 (3)加底物显色。加酸终止反应后,读取吸光度(A),绘制曲线如图15-10。读取A值在1.0时的酶标抗稀释度,作为酶标抗体的工作浓度。该酶标抗人IgG的工作浓度应为1/1600。 血栓素B2ELISA试剂盒常用酶辣根过氧化酶(HRP)】 1. HRP在蔬菜作物辣根中含量很高。 2. 是一种糖蛋白,含糖量约18%;分子量为44kD。 3. 是一种复合酶,由主酶(酶蛋白)和辅基(亚铁血红素)结合而成的一种卟啉蛋白质。 4. 主酶为无色糖蛋白,在275nm波长处有最高吸收峰;辅基是深棕色的含铁卟啉环,在403nm波长处有最高吸收峰。 血栓素B2ELISA试剂盒用于稀释高浓度的结合物以配成工作液。为避免结合物在反应中直接吸附在固相载体上,在稀释缓冲液中常加入高浓度的无关蛋白质(例如1%牛血清白蛋白),通过竞争以抑制结合物的吸附。一般还加入具有抑制蛋白质吸附于塑料表面的非离子型表面活性剂,如吐温20,0.05%的浓度较为适宜。在间接测定抗体时,血清标本需稀释后进行测定,也可应用这种稀释液。 血栓素B2(TXB2)ELISA试剂盒使用目的: 本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中S100钙粒蛋白A(S100A8)含量。 血栓素B2ELISA试剂盒标本要求 1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融 2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

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