Copure® MCX | GB 31658.23-2022猪肉中硝基咪唑类药物残留量的测定

1）称取 2g猪肉样品于50 mL塑料离心管中，加入0.100μg/mL混合内标工作液100μL，涡旋30s混匀，静置10min。加入乙酸乙酯15mL，振荡10min，9500r/min离心5min，吸取上层清液于另一个50mL离心管中。

2）用15mL 乙酸乙酯重复提取1次，合并提取液，于40℃水浴氮气吹干 。

1）残余物中加入0.1mol/L盐酸溶液5mL，涡旋1min充分溶解，加正己烷5mL,振摇1min，9500r/min离心5min，弃正己烷层，下层再加正己烷5mL重复除脂一次，弃正己烷层，下层水相备用。

2）用3mL甲醇、3mL 0.1mol/L盐酸溶液依次活化MCX混合型阳离子交换反相固相萃取柱；取全部备用液过柱，依次用3mL 0.1mol/L盐酸溶液、3mL甲醇淋洗，抽干；加5mL 5%氨化甲醇洗脱，抽干，收集洗脱液。

3）将收集的洗脱液于40℃下氮吹至近干，加0.1%甲酸水溶液定容至0.5mL，涡旋30s溶解残渣，过0.22 μm微孔滤膜，上机测定。

SDC-3000-D 多管旋涡混匀仪

精密量取混合标准工作液、混合内标工作液适量，用0.1%甲酸水溶液稀释成浓度为0.500μg/L、1.00μg/L、2.00 μg/L、5.00 μg/L、10.0 μg/L、25.0 μg/L的系列标准工作液，内标为20.0μg/L，过0.22μm微孔滤膜，上机测定。

仪器设备：液相色谱-串联四级杆质谱仪

（Triple Quad 5500）

色谱柱：ACQUITY UPLC BEH C18 1.7m 2.150mm Column

流动相： A：0.1%甲酸水    B：乙腈

流动相梯度：初始95%A，95%A（0 min~1.00 min），10%A（1.00 min~3.00min），10%A（3.00 min~4.20min），95%A（4.20 min~4.50min）， 95%A（4.50min~5.00min）

流速：0.300 mL/min

柱温：40℃

进样体积：4.0 μL

质谱条件：

检测方式：多反应离子监测（MRM）

表1 离子源控制条件

表2 待测药物定性离子对、定量离子对、

保留时间、去簇电压和碰撞能量参考值

注：*为定量离子。

表3 2.50μg/kg猪肉中硝基咪唑类药物

加标回收实验结果

图1  硝基咪唑类药物总离子流图

 图2  硝基咪唑类药物同位素内标标准

溶液特征离子质量色谱图 (20.0μg/L) 

图3 硝基咪唑类药物标准溶液特征离子质量色谱图 (2.00μg/L)