猪肉中 19 种兽药多残留的 UPLC/ MS/MS 分析（Lipoclean）

一、样品提取

1）称取猪肉 2.0g 于 50mL 离心管中，加入浓度为 100ppm 氟 尼辛 -D3 内标物 40μL，再加 2.0mL 0.1M Na2EDTA 溶液，涡 旋混匀 1min，冰浴超声提取 10min，于 4℃ 9000r/min 下离 心 5min，移上清液于另一 15mL 离心管中； 

2） 再 加 入 7.0mL 2% 甲 酸 乙 腈 于 50mL 离 心 管 中， 涡 旋 5min，于 4℃ 9000r/min 下离心 5min，合并两次上清液，用 2% 甲酸乙腈定容至 10mL； 3） 将 合 并 定 容 后 的 上 清 液， 于 4 ℃ 9000r/min 下 离 心 5min，待净化。 

二、 样品净化（Lipoclean 磷脂去除柱，300mg/3mL） 

上样：取 2.5mL 待净化液过柱，重力作用下洗脱，收集流 出液； 

洗脱：再加 625μL 80% 乙腈水进行二次洗脱，收集流出液， 施加真空排空液体，合并两次流出液； 将 0.5mL样品洗脱液和 0.3mL H2O加入到样品瓶中，涡旋混匀， 过 0.22μm 有机滤膜供上机测试。 

三、标曲配制 

采用空白基质配制标曲，内标法定量，标曲浓度范围 0.5~100  ppb。 

四、仪器条件 

色谱条件： 仪器：UPLC/MS/MS (Thermo Fisher TQS Endura ) 色谱柱：CommaSil® ODS (2.1mm×50mm, 1.8μm) 流动相：A：水 ( 含 0.1% 甲酸） B：甲醇（含 0.1% 甲酸） 洗脱方式：梯度洗脱，见表 1

表 1 梯度洗脱程序

六 注意事项 

1. 为防止沙星类化合物的损失，故先使用 0.1M Na2EDTA 缓冲液进 行水溶液萃取。 

2. 为改善与固体残留物的相分离，进一步降低温度对部分目标物 的影响，建议使用低温离心 (4℃ )。 

3. 为进一步确保蛋白及部分固体残留物的有效去除，建议使用高 速离心 (9000r/min)。 

4. 建议加入内标物，采用空白基质配制标曲，有利于校正目标分 析物的回收率。