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猪肉中硝基呋喃类代谢物检测的固相萃取方法（Copure® HLB）

2021/11/29 10:01

阅读：54

应用领域：

食品/农产品

发布时间：

2021/11/29

检测样品：

畜禽肉及副产品

检测项目：

理化分析

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参考标准：

GB/T 20752-2006 猪肉、牛肉、鸡肉、猪肝和水产品中硝基呋喃类代谢物残留量的测定

方案摘要：

SPE 柱净化（Copure® HLB，60 mg/3 mL）活化：依次用 5 mL 甲醇、10 mL 水活化。上样和洗脱：取上述备用液控制流速小于 2 mL/min 过柱。待样液全部通过后用 10 mL 水淋洗上样柱，弃去全部流出液并真空抽干，最后用 5 mL 乙酸乙酯洗脱柱子上的待测成分。重新溶解：收集洗脱液，于 40℃氮气吹干，准确加入 1 mL 乙腈 / 水溶液 (1:2, v/v) 溶液溶解残余物混匀，0.22 µm 滤膜过滤，供高效液相色谱测定。

产品配置单：

前处理设备

智能水浴氮吹

型号： BN24

产地：深圳

品牌： Biocomma

¥5.98万

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多管涡旋混匀仪

型号： SDC-3000

产地：深圳

品牌： Biocomma

¥2.88万

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设备配件

Copure 亲水亲脂平衡SPE柱

型号：

产地：

品牌： Copure

¥2000

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60mg/3mL 通用品牌HLB

型号：

产地：

品牌：逗点

¥1014

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方案详情：

一、样品提取

样品称取脱脂：称取均质后的待测样品 2.00 g( 精确到 0.01 g)，置于 50 mL 离心管中加入 10 mL 甲醇 / 水混合物 (2:1, v/v)，振荡混匀 10 min，4000 r/min 离心 10 min，吸取清液弃掉，离心管中试样备用。

水解衍生化：向上述离心管中加入 20 mL 0.2 mol/L 盐酸，振荡混匀 10 min，后加入 0.4 mL 0.05 mol/L 2- 硝基苯甲醛 (0.075 g 2- 硝基苯甲醛溶于 10 mL 二甲亚砜 )，涡旋混匀 1 min，置于 37℃恒温振荡器水浴中避光反应 16 h。将上述衍生液，放置至室温，加入 5 mL 0.1 mol/L 磷酸氢二钾溶液，用 1 mol/L NaOH 调节 pH 到约 7.4，4000 r/min 离心 10 min，上清液 ( 对脂肪含量多的试样，可加入 5 mL 正己烷，振荡 2 min，4000 r/min 离心 5 min 吸取并弃掉正己烷 ) 待净化。

二、SPE 柱净化（Copure® HLB，60 mg/3 mL）

活化：依次用 5 mL 甲醇、10 mL 水活化。

上样和洗脱：取上述备用液控制流速小于 2 mL/min 过柱。待样液全部通过后用 10 mL 水淋洗上样柱，弃去全部流出液并真空抽干，最后用 5 mL 乙酸乙酯洗脱柱子上的待测成分。

重新溶解：收集洗脱液，于 40℃氮气吹干，准确加入 1 mL 乙腈 / 水溶液 (1:2, v/v) 溶液溶解残余物混匀，0.22 µm 滤膜过滤，供高效液相色谱测定。

三、仪器条件

设备：Waters Alliance 2695 色谱柱：XB-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 µm) 检测器：Waters 2487 紫外检测器检测波长：275 nm 流动相：A：乙腈 B：0.01 mol/L乙酸铵（0.77 g乙酸铵用水定容至 1 L，甲酸调 pH=3.5）洗脱方式：梯度洗脱，见表 1

表 1 流动相梯度洗脱程序

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Copure® PWAX | GB 5009.35-2023糖果和水果罐头中11种合成着色剂的测定

牛奶中四环素类药物检测的固相萃取方法（Copure® HLB）

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