人体尿液中儿茶酚胺及其代谢物的检测

    儿茶酚胺（CAs）是一种含有儿茶酚和胺基的神经类物质。儿茶酚和胺基通过L-络氨酸在交感神经、肾上腺髓质和亲铬细胞位置的酶化步骤结合。通常，儿茶酚胺是指多巴胺（DA）、去甲肾上腺素（NE）和肾上腺素（E），而去甲变肾上腺素（NMN，又名甲氧基去甲肾上腺素）、变肾上腺素（MN，又名甲氧基肾上腺素）和3-甲氧基酪胺（3-MT）分别是NE、E和DA的代谢产物。

   尿液中CAs及其代谢物水平与人体多种生理、病理现象有密切关系，临床研究发现CAs 可以用于临床辅助诊断高血压、甲亢、嗜铬细胞瘤和神经母细胞瘤等内分泌相关疾病，其代谢物MN以及NMN对诊断嗜铬细胞瘤和神经母细胞瘤有极高的敏感度与准确度，是内分泌指南推荐的首选检测指标。

   本方案建立了尿液中CAs及其代谢物测定方法，并对其进行了方法学验证。经验证方法定量限为5 ng/mL，低中高三水平加标回收率介于90%-110%之间，低中高质控CV值小于8%。

二、实验结果

2.1 色谱图

儿茶酚胺及其代谢物以及其同位素内标提取离子色谱图分别见图2。

2.2 校正曲线

E、NE、DA、MN、NMN、3-MT基质校正曲线见图3，线性范围2-200 ng/mL，线性相关性R²＞0.998。

2.3 回收率及稳定性

从表2可以看出，不用加标浓度下，6种化合物都有较好的回收率。

该部分实验从不同批次萃取板中抽取不同孔位进行测试。从目标化合物的结果可以看出，该产品稳定 性良好 。

三、总结 

 本方法通过 HPLC-MS/MS 对尿液中儿茶酚胺及其代谢物进行联合测定，对方法回收率、 定量限进行实验，并为考察方法稳定性进行了批间、日内、日间稳定性等方面的验证，方法 稳定可靠，灵敏度高，特异性强，满足检测要求。