人小细胞肺癌细胞，NCI-H446细胞

人小细胞肺癌细胞，NCI-H446细胞 NCI-H446 贴壁上皮细胞

（1）细胞背景

该细胞是1982年由Carney D和Gazdar AF等从一位小细胞肺癌患者的胸腔积液中建立的。细胞的原始形态并不具有小细胞肺癌特征。这个细胞株是小细胞肺癌的生化和形态学上的变种，表达神经元特有的烯醇酶和脑型肌酸激酶同工酶；左旋多巴脱羧酶、蚕素、抗利尿激素、催产素或胃泌激素释放肽未达到可检测水平。与正常细胞相比，该细胞c-myc DNA序列扩增约20倍，RNA增加15倍。最初传代培养基用含有5%FBS的RPMI1640，另外添加10 nM氢化可的松、0.005 mg/ml胰岛素、0.01 mg/ml转铁蛋白、10 nM 17-β雌二醇和30 nM亚硒酸钠。

（2）客户自备试剂

1）PBS

2）RPMI-1640培养基（不含Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%双抗

3）0.25% （W/V）胰蛋白酶（含0.02% EDTA）

（3）细胞背景

1）生长方式：贴壁

2）种属：Homo sapiens 人

（4）培养条件

1）培养基：RPMI-1640培养基（不含Hepes）+ 10%胎牛血清+ 1%双抗

2）温度：37.0°C

3）气体:空气 95%，CO2 5%

（5）培养方法

 收到细胞后，在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况：

 如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，留10ml培养液继续培养。

 如果细胞已长满（达80-90%）。即可进行传代，具体步骤如下：

1）弃去培养液，用PBS洗1-2次。

2）向瓶内加入1.0-2.0ml胰蛋白酶液，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆，迅速拿回操作台，吸取胰蛋白酶，加含有6ml 含10%血清的培养液，轻轻吹打细胞。

3）加入等量的的培养液，轻轻吹打混匀后吸出一半，分到新的培养

4）传代比例：1:2-1:3

（6）常见问题及解决方案

1）培养瓶有破裂，培养液有漏液：细胞极大可能会污染，所以我们会及时安排帮老师解决。

2）细胞漂浮：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察，如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以去掉，留10ml培养液培养观察，细胞生长至汇合度80%，进行消化传代；如细胞还是不贴壁，将细胞离心收集转到新培养瓶，原培养瓶加部分培养液继续培养，中间注意观察，我们的技术人员会一直跟踪指导，直到问题解决。

公司细胞的简洁信息：

（1）储存：液氮。

（2）运输：干冰。

（3）用途：只可用于科研。

（4）第二代培养末期液氮冻存。

（5）人小细胞肺癌细胞，NCI-H446细胞每冻存管细胞数：>5×105 cells/1ml。

（6）不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

收到人小细胞肺癌细胞，NCI-H446细胞后的处理：

1）收到细胞后，首先观察瓶身是否完好（注意有无缝隙，裂痕）。

2）显微镜下观察细胞的生长状况，有无细胞漂浮。

3）用新洁尔灭消毒瓶口及瓶身。

4）打开瓶口，再次用新洁尔灭消毒瓶口（可能会有液体溢出，注意不要碰到液体），酒精灯烤瓶口消毒。

5）将培养液转移至50ml离心管或广口瓶中（若细胞漂浮严重，离心培养基，1000g*5分钟，将离心后的培养基转移至另一个大离心管中，留一点吹打细胞沉淀成悬液，回收细胞至原培养瓶），若漂浮不严重，亦离心一下。

6）在原培养瓶中留一部分原装培养液，再补加自己新配的培养基至适当容积，例如4ml，让细胞适应一下环境。  当细胞长到70-80%，冻存大部分，小部分传代。

A90688 人复制蛋白A(RPA-70)酶联免疫试剂盒 ，英文名： Human RPA-70 ELISA Kit ，规格： 48T/96T

A90689 人附睾蛋白4(HE4)酶联免疫试剂盒 ，英文名： Human HE4 ELISA kit ，规格： 48T/96T

A90690 人辅酶Q10(CoQ10)酶联免疫试剂盒 ，英文名： Human Coenzyme Q10,CoQ10 ELISA Kit ，规格： 48T/96T

A90691 人脯氨酸肽酶(PEPD)酶联免疫试剂盒 ，英文名： Human PEPD ELISA Kit ，规格： 48T/96T

A90692 人脯氨酸羟化酶(PHD)酶联免疫试剂盒 ，英文名： Human PHD ELISA Kit ，规格： 48T/96T

A90693 人脯氨酸/谷氨酰铵富含性剪接因子(SFPQ)酶联免疫试剂盒 ，英文名： Human SFPQ ELISA Kit ，规格： 48T/96T

A90694 人封闭蛋白4(CLDN4)酶联免疫试剂盒 ，英文名： Human CLDN4 ELISA Kit ，规格： 48T/96T

A90695 人分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)酶联免疫试剂盒 ，英文名： Human SFRP5 ELISA Kit ，规格： 48T/96T

A90696 人分泌型卷曲相关蛋白4(SFRP4)酶联免疫试剂盒 ，英文名： Human SFRP4 ELISA Kit ，规格： 48T/96T

A90697 人分泌型卷曲相关蛋白2(SFRP2)酶联免疫试剂盒 ，英文名： Human SFRP2 ELISA Kit ，规格： 48T/96T

A90698 人分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)酶联免疫试剂盒 ，英文名： Human SFRP1 ELISA Kit ，规格： 48T/96T

A90699 人分泌粒蛋白1(嗜铬粒蛋白B)(CHGB/SCG1)酶联免疫试剂盒 ，英文名： Human CHGB/SCG1 ELISA kit ，规格： 48T/96T

A90700 人肺炎衣原体抗原(Cpn)酶联免疫试剂盒 ，英文名： Human chlamydia pneumoniae,Cpn ELISA Kit ，规格： 48T/96T

A90701 人肺炎衣原体抗体IgM(Cpn-IgM)酶联免疫试剂盒 ，英文名： Human Chlamydia pneumoniae antibody,Cpn-IgM ELISA Kit ，规格： 48T/96T

A90702 人肺炎衣原体抗体IgA(Cpn-IgA)酶联免疫试剂盒 ，英文名： Human Cpn-IgA ELISA Kit ，规格： 48T/96T

A90703 人肺炎衣原体抗体(Cpn-Ab)酶联免疫试剂盒 ，英文名： Human Chlamydia pneumoniae antibody,Cpn-Ab ELISA Kit ，规格： 48T/96T

A90704 人肺炎衣原体(Cpn)抗体(IgG)酶联免疫试剂盒 ，英文名： Human Chlamydia pneumoniae(Cpn)antibody(IgG)ELISA Kit ，规格： 48T/96T

A90705 人肺特异性X蛋白(LUNX)酶联免疫试剂盒 ，英文名： Human LUNX ELISA Kit ，规格： 48T/96T

A90706 人肺表面活性蛋白D(SP-D)酶联免疫试剂盒 ，英文名： Human SP-D ELISA Kit ，规格： 48T/96T

A90707 人腓骨蛋白2(FBLN2)酶联免疫试剂盒 ，英文名： Human Fibulin-2,FBLN2 ELISA kit ，规格： 48T/96T

A90708 人肥胖抑制素(Obestatin)酶联免疫试剂盒 ，英文名： Human Obestatin ELISA kit ，规格： 48T/96T

A90709 人肥大细胞类胰凝乳蛋白酶酶联免疫试剂盒 ，英文名： Human Mast Cell Chymase ELISA Kit ，规格： 48T/96T

A90710 人肥大细胞类羧肽酶酶联免疫试剂盒 ，英文名： Human Mast Cell Carboxypeptidase ELISA Kit ，规格： 48T/96T

A90711 人非小细胞肺癌相关抗原211(CA211)酶联免疫试剂盒 ，英文名： Human cyfra211,CA211 ELISA kit ，规格： 48T/96T

A90712 人非甲基化寡核苷酸(NON)酶联免疫试剂盒 ，英文名： Human nonmethylated oligonucleotide,NON ELISA Kit ，规格： 48T/96T

A90713 人防御素 酶联免疫试剂盒 ，英文名： Human defensins ELISA Kit ，规格： 48T/96T

A90714 人芳香烃受体(AhR)酶联免疫试剂盒 ，英文名： Human AhR ELISA Kit ，规格： 48T/96T

A90715 人泛素激活酶(E1/UBAE)酶联免疫试剂盒 ，英文名： Human E1/ubiquitin-activating enzyme,E1/UBAE ELISA Kit ，规格： 48T/96T

A90716 人泛素蛋白(Ub)酶联免疫试剂盒 ，英文名： Human ubiquitin,Ub ELISA Kit ，规格： 48T/96T

A90717 人反三碘甲状腺原氨酸(rT3)酶联免疫试剂盒 ，英文名： Human ReverseTri-iodothyronine,rT3 ELISA Kit ，规格： 48T/96T

A90718 人法尼基二磷酸法尼基转移酶1(FDFT1)酶联免疫试剂盒 ，英文名： Human farnesyl-diphosphate farnesyltransferase 1,FDFT1 ELISA Kit ，规格： 48T/96T

A90719 人法尼醇X受体(FXR)酶联免疫试剂盒 ，英文名： Human farnesoid X receptor,FXR ELISA Kit ，规格： 48T/96T

A90720 人二酰基甘油(DAG/DG)酶联免疫试剂盒 ，英文名： Human diacyl glycerol,DAG/DG ELISA Kit ，规格： 48T/96T

A90721 人二氢嘧啶脱氢酶[NADP+](DPYD)酶联免疫试剂盒 ，英文名： Human Dihydropyrimidine dehydrogenase[NADP+](DPYD)ELISA kit ，规格： 48T/96T

A90722 人二羟基赖正己氨酸(DHLNL)酶联免疫试剂盒 ，英文名： Hurman dihydroxylysinonorleucine,DHLNL ELISA kit ，规格： 48T/96T

A90723 人儿茶酚抑素酶联免疫试剂盒 ，人小细胞肺癌细胞，NCI-H446细胞英文名： Human catestatin ELISA Kit ，规格： 48T/96T

A90724 人鹅膏蕈碱酶联免疫试剂盒 ，英文名： Human Amanitin ELISA Kit ，规格： 48T/96T

A90725 人多萜长醇二磷酸寡糖蛋白环糊精糖基转移酶(DDOST/OST-48)酶联免疫试剂盒 ，英文名： Human DDOST ELISA Kit ，规格： 48T/96T

A90726 人多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)酶联免疫试剂盒 ，英文名： Human Poly ADP ribose polymerase,PARP ELISA Kit ，规格： 48T/96T

A90727 人多功能蛋白聚糖(versican)酶联免疫试剂盒 ，英文名： human versican/PG-M/PG-350 ELISA kit ，规格： 48T/96T

A90728 人多巴铵脱羧酶(DDC)酶联免疫试剂盒 ，英文名： Human dopamine decarboxylase,DDC ELISA Kit ，规格： 48T/96T