人乳腺癌细胞,MDA-MB-468细胞 MDA-MB-468 贴壁上皮细胞
(1)细胞背景
该细胞是1977年由Cailleau R等从一位患有转移性乳腺癌的51岁黑人女性的胸腔积液中分离得到的。虽然供体组织的G6PD等位基因杂合,但此细胞株始终表现为G6PD A表型。P53基因273位密码子存在G→A突变,从而导致Arg→His替代。每个细胞上存在1×106个EGF受体。
(2)客户自备试剂
1)PBS
2)DMEM(高糖)培养基+ 10%胎牛血清+ 1%双抗
3)0.25% (W/V)胰蛋白酶(含0.02% EDTA)
(3)细胞背景
1)生长方式:贴壁
2)种属:Homo sapiens 人
(4)培养条件
1)培养基:DMEM(高糖)培养基+ 10%胎牛血清+ 1%双抗
2)温度:37.0°C
3)气体:空气 95%,CO2 5%
(5)培养方法
收到细胞后,在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况:
如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,留10ml培养液继续培养。
如果细胞已长满(达80-90%)。即可进行传代,具体步骤如下:
1)弃去培养液,用PBS洗1-2次。
2)向瓶内加入1.0-2.0ml胰蛋白酶液,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆,迅速拿回操作台,吸取胰蛋白酶,加含有6ml 含10%血清的培养液,轻轻吹打细胞。
3)加入等量的的培养液,轻轻吹打混匀后吸出一半,分到新的培养
4)传代比例:1:2-1:3
(6)常见问题及解决方案
1)培养瓶有破裂,培养液有漏液:细胞极大可能会污染,所以我们会及时安排帮老师解决。
2)细胞漂浮:培养瓶不开封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察,如细胞大部分又贴回瓶底,表明细胞活力正常,剩余漂浮的细胞可以去掉,留10ml培养液培养观察,细胞生长至汇合度80%,进行消化传代;如细胞还是不贴壁,将细胞离心收集转到新培养瓶,原培养瓶加部分培养液继续培养,中间注意观察,我们的技术人员会一直跟踪指导,直到问题解决。
公司细胞的简洁信息:
(1)储存:液氮。
(2)运输:干冰。
(3)用途:只可用于科研。
(4)第二代培养末期液氮冻存。
(5)人乳腺癌细胞,MDA-MB-468细胞每冻存管细胞数:>5×105 cells/1ml。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
收到人乳腺癌细胞,MDA-MB-468细胞后的处理:
1)收到细胞后,首先观察瓶身是否完好(注意有无缝隙,裂痕)。
2)显微镜下观察细胞的生长状况,有无细胞漂浮。
3)用新洁尔灭消毒瓶口及瓶身。
4)打开瓶口,再次用新洁尔灭消毒瓶口(可能会有液体溢出,注意不要碰到液体),酒精灯烤瓶口消毒。
5)将培养液转移至50ml离心管或广口瓶中(若细胞漂浮严重,离心培养基,1000g*5分钟,将离心后的培养基转移至另一个大离心管中,留一点吹打细胞沉淀成悬液,回收细胞至原培养瓶),若漂浮不严重,亦离心一下。
6)在原培养瓶中留一部分原装培养液,再补加自己新配的培养基至适当容积,例如4ml,让细胞适应一下环境。 当细胞长到70-80%,冻存大部分,小部分传代。
A87965 氯化钠结晶紫增菌液 ,规格: 500毫升 ,保存条件: 2~8℃
A87966 氯化钠蔗糖琼脂 ,规格: 100毫升 ,保存条件: 2~8℃
A87967 嗜盐菌选择性琼脂 ,规格: 500毫升 ,保存条件: 2~8℃
A87968 3.5%纯度氯化钠三糖铁琼脂 ,规格: 100毫升 ,保存条件: 2~8℃
A87969 氯化钠血琼脂基础 ,规格: 150毫升 ,保存条件: 2~8℃
A87970 霍乱双糖铁琼脂 ,规格: 150毫升 ,保存条件: 2~8℃
A87971 T1N1琼脂 ,规格: 150毫升 ,保存条件: 2~8℃
A87972 T1NO肉汤 ,规格: 150毫升 ,保存条件: 2~8℃
A87973 T1N3肉汤 ,规格: 150毫升 ,保存条件: 2~8℃
A87974 MCPC培养基 ,规格: 750毫升 ,保存条件: 2~8℃
A87975 副溶血性弧菌琼脂 ,规格: 1克 ,保存条件: RT
A87976 副溶血性弧菌增菌液 ,规格: 5克 ,保存条件: RT
A87977 改良磷酸盐缓冲液 ,规格: 10克 ,保存条件: RT
A87978 CIN-1I培养基 ,规格: 50克 ,保存条件: RT
A87979 改良Y培养基 ,规格: 10克 ,保存条件: RT
A87980 ITC肉汤 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A87981 改良克氏双糖 ,规格: 10克 ,保存条件: RT
A87982 氯化镁孔雀绿增菌液 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A87983 酸性肉汤 ,规格: 10克 ,保存条件: RT
A87984 麦芽浸膏汤 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A87985 锰盐营养琼脂培养基 ,规格: 10克 ,保存条件: RT
A87986 肠道菌计数琼脂 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A87987 肠道菌增菌肉汤 ,规格: 10克 ,保存条件: RT
A87988 察氏琼脂 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A87989 高盐察氏琼脂 ,规格: 10克 ,保存条件: RT
A87990 察氏蛋白胨培养基 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A87991 亚硫酸铋琼脂基础 ,规格: 10克 ,保存条件: RT
A87992 肠球菌琼脂 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A87993 滤膜肠球菌琼脂 ,规格: 10克 ,保存条件: RT
A87994 缓冲蛋白胨水增菌液 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A87995 甘露醇琼脂培养基 ,规格: 500克 ,保存条件: RT
A87996 胰酪胨大豆酵母浸膏肉汤 ,规格: 10克 ,保存条件: RT
A87997 胰酪胨大豆酵母浸膏琼脂 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A87998 李氏菌增菌肉汤(LB1,LB2)基础 ,规格: 500克 ,保存条件: RT
A87999 缓冲李氏菌增菌肉汤基础 ,规格: 10克 ,保存条件: RT
A88000 PALCAM琼脂 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A88001 牛津琼脂基础 ,规格: 500克 ,保存条件: RT
A88002 LPM琼脂 ,规格: 10克 ,保存条件: RT
A88003 Half Fraser培养基 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A88004 SIM动力培养基 ,规格: 10克 ,保存条件: RT
A88005 李氏菌选择性培养基基础 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A88006 EB增菌肉汤培养基基础 ,规格: 500克 ,保存条件: RT
A88007 Fraser培养基 ,规格: 10克 ,保存条件: RT
A88008 UVM培养基 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A88009 LM-137琼脂 ,规格: 500克 ,保存条件: RT
A88010 改良缓冲蛋白胨水 ,规格: 10克 ,保存条件: RT
A88011 枸橼酸盐培养基 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A88012 Christensen尿素琼脂 ,规格: 500克 ,保存条件: RT
A88013 尿素酶琼脂基础 ,规格: 10克 ,保存条件: RT
A88014 MR-VP培养基 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A88015 缓冲葡萄糖蛋白胨水 ,规格: 500克 ,保存条件: RT
A88016 V-P半固体琼脂 ,规格: 10克 ,保存条件: RT
A88017 胰蛋白胨水 ,规格: 100克 ,人乳腺癌细胞,MDA-MB-468细胞保存条件: RT
A88018 明胶培养基 ,规格: 10克 ,保存条件: RT
A88019 盐胨水培养基 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A88020 靛基质试验培养基 ,规格: 10克 ,保存条件: RT
A88021 吲哚培养基 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A88022 丙二酸钠培养基 ,规格: 10克 ,保存条件: RT