人乳腺癌细胞,T47D细胞 T47D 贴壁上皮细胞
(1)细胞背景
T-47由I Keydar分离自一位54岁乳房侵入性导管癌的女性患者的胸腔积液;分化的上皮亚株(T-47D)有细胞质连接和17β雌二醇及其他类固醇激素、降钙素的受体;表达WNT7B癌基因。
(2)客户自备试剂
1)PBS
2)RPMI-1640培养基(不含Hepes)+ 10%胎牛血清+ 1%双抗
3)0.25% (W/V)胰蛋白酶(含0.02% EDTA)
(3)细胞背景
1)生长方式:贴壁
2)种属:Homo sapiens 人
(4)培养条件
1)培养基:RPMI-1640培养基(不含Hepes)+ 10%胎牛血清+ 1%双抗
2)温度:37.0°C
3)气体:空气 95%,CO2 5%
(5)培养方法
收到细胞后,在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况:
如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,留10ml培养液继续培养。
如果细胞已长满(达80-90%)。即可进行传代,具体步骤如下:
1)弃去培养液,用PBS洗1-2次。
2)向瓶内加入1.0-2.0ml胰蛋白酶液,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆,迅速拿回操作台,吸取胰蛋白酶,加含有6ml 含10%血清的培养液,轻轻吹打细胞。
3)加入等量的的培养液,轻轻吹打混匀后吸出一半,分到新的培养
4)传代比例:1:2-1:3
(6)常见问题及解决方案
1)培养瓶有破裂,培养液有漏液:细胞极大可能会污染,所以我们会及时安排帮老师解决。
2)细胞漂浮:培养瓶不开封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察,如细胞大部分又贴回瓶底,表明细胞活力正常,剩余漂浮的细胞可以去掉,留10ml培养液培养观察,细胞生长至汇合度80%,进行消化传代;如细胞还是不贴壁,将细胞离心收集转到新培养瓶,原培养瓶加部分培养液继续培养,中间注意观察,我们的技术人员会一直跟踪指导,直到问题解决。
公司细胞的简洁信息:
(1)储存:液氮。
(2)运输:干冰。
(3)用途:只可用于科研。
(4)第二代培养末期液氮冻存。
(5)人乳腺癌细胞,T47D细胞每冻存管细胞数:>5×105 cells/1ml。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
收到人乳腺癌细胞,T47D细胞后的处理:
1)收到细胞后,首先观察瓶身是否完好(注意有无缝隙,裂痕)。
2)显微镜下观察细胞的生长状况,有无细胞漂浮。
3)用新洁尔灭消毒瓶口及瓶身。
4)打开瓶口,再次用新洁尔灭消毒瓶口(可能会有液体溢出,注意不要碰到液体),酒精灯烤瓶口消毒。
5)将培养液转移至50ml离心管或广口瓶中(若细胞漂浮严重,离心培养基,1000g*5分钟,将离心后的培养基转移至另一个大离心管中,留一点吹打细胞沉淀成悬液,回收细胞至原培养瓶),若漂浮不严重,亦离心一下。
6)在原培养瓶中留一部分原装培养液,再补加自己新配的培养基至适当容积,例如4ml,让细胞适应一下环境。 当细胞长到70-80%,冻存大部分,小部分传代。
A87590 羧甲淀粉钠 ,规格: 5克 ,保存条件: RT,避光
A87591 麦角固醇 ,规格: 25克 ,保存条件: RT,避光
A87592 亚铁氢化钾 ,规格: 1克 ,保存条件: RT
A87593 硼氢化钠 ,规格: 5克 ,保存条件: RT
A87594 角豆胶 ,规格: 100毫升 ,保存条件: 2~8℃
A87595 氢碘酸 ,规格: 10片 ,保存条件: 保存:-20℃
A87596 肥皂草素 ,规格: 50片 ,保存条件: 保存:-20℃
A87597 异丙铵 ,规格: 5克 ,保存条件: RT
A87598 小麦胚芽粉 ,规格: 25克 ,保存条件: RT
A87599 麦芽浸出粉 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A87600 麦芽浸膏 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A87601 脱脂奶粉 ,规格: 1克 ,保存条件: RT
A87602 血清消化粉 ,规格: 5克 ,保存条件: RT
A87603 全胃浸粉 ,规格: 25克 ,保存条件: RT
A87604 心浸粉(牛) ,规格: 250克 ,保存条件: RT
A87605 肝浸粉(牛) ,规格: 1克 ,保存条件: 2~8℃,避光
A87606 脑浸粉(牛) ,规格: 5克 ,保存条件: 2~8℃,避光
A87607 蛋清粉 ,规格: 25克 ,保存条件: 2~8℃,避光
A87608 蛋黄粉 ,规格: 100克 ,保存条件: 2~8℃,避光
A87609 琼脂粉 ,规格: 25克 ,保存条件: RT,避光
A87610 细菌琼脂粉 ,规格: 100克 ,保存条件: RT,避光
A87611 猪胆粉 ,规格: 100克 ,保存条件: RT,避光
A87612 牛肉粉 ,规格: 500克 ,保存条件: RT,避光
A87613 小牛浸膏粉 ,规格: 100克 ,保存条件: RT,避光
A87614 牛肉浸膏 ,规格: 500克 ,保存条件: RT,避光
A87615 酵母浸出粉 ,规格: 10克 ,保存条件: RT
A87616 酵母浸出膏 ,规格: 25克 ,保存条件: RT
A87617 三号胆盐 ,规格: 5克 ,保存条件: RT,避光
A87618 五号胆盐 ,规格: 5克 ,保存条件: RT,避光
A87619 七号胆盐 ,规格: 25克 ,保存条件: RT,避光
A87620 羊胆盐 ,规格: 5克 ,保存条件: RT
A87621 猪胆盐 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A87622 禽胆盐 ,规格: 500克 ,保存条件: RT
A87623 酸水解酪蛋白 ,规格: 10克 ,保存条件: RT
A87624 酪蛋白氨基酸(酸解) ,规格: 25克 ,保存条件: RT
A87625 酶水解干酪素 ,规格: 100克 ,保存条件: RT,避光
A87626 大豆分离蛋白 ,规格: 50克 ,保存条件: RT
A87627 大豆蛋白(脱脂脱腥) ,规格: 5克 ,保存条件: RT,避光
A87628 水解乳清蛋白 ,规格: 25克 ,保存条件: RT,避光
A87629 小牛血清 ,规格: 100克 ,保存条件: RT,避光
A87630 标准胎牛血清 ,规格: 10克 ,保存条件: RT
A87631 优级胎牛血清 ,规格: 10克 ,保存条件: RT
A87632 特级胎牛血清 ,规格: 1克 ,保存条件: RT,避光
A87633 新生牛血清 ,规格: 5克 ,保存条件: RT
A87634 马血清 ,规格: 25克 ,保存条件: RT
A87635 无菌绵羊血 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A87636 鸡血清(无菌) ,规格: 500克 ,保存条件: RT
A87637 猪血清(无菌) ,规格: 25克 ,保存条件: RT
A87638 狗血清(无菌) ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A87639 兔血清(无菌) ,规格: 500克 ,保存条件: RT
A87640 小鼠血清(无菌) ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A87641 大鼠血清(无菌) ,规格: 500克 ,保存条件: RT
A87642 豚鼠血清(无菌) ,规格: 5克 ,保存条件: RT
A87643 山羊血清(无菌) ,规格: 5克 ,保存条件: RT
A87644 大豆卵磷脂 ,规格: 5克 ,保存条件: RT
A87645 卵磷脂(蛋黄) ,规格: 1克 ,保存条件: RT
A87646 无氨基酵母氮源 ,规格: 5克 ,保存条件: RT
A87647 明胶 ,规格: 10克 ,保存条件: RT
A87648 蛋白胨 ,规格: 25克 ,保存条件: RT
A87649 胰蛋白胨 ,规格: 1克 ,人乳腺癌细胞,T47D细胞保存条件: RT
A87650 胰酪胨 ,规格: 25克 ,保存条件: RT
A87651 胰酪胨 ,规格: 100克 ,保存条件: RT
A87652 月示胨 ,规格: 1克 ,保存条件: 2~8℃,避光
A87653 示蛋白胨(鱼粉) ,规格: 10克 ,保存条件: 2~8℃,避光
A87654 鱼粉蛋白胨 ,规格: 25克 ,保存条件: 2~8℃,避光
A87655 大豆蛋白胨 ,规格: 100克 ,保存条件: 2~8℃,避光